[發明專利]基于SCAR分子標記鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的方法在審
| 申請號： | 202210156994.0 | 申請日： | 2022-02-21 |
| 公開（公告）號： | CN114438248A | 公開（公告）日： | 2022-05-06 |
| 發明（設計）人： | 蔣研風羊;晁志;鄭如文;謝雪那;劉宏;黃榮;杜海泳 | 申請（專利權）人： | 廣州白云山光華制藥股份有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 廣州廣典知識產權代理事務所(普通合伙) 44365 | 代理人： | 顧書玲;萬志香 |
| 地址： | 510285 *** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 基于 scar 分子 標記 鑒定 竹葉 柴胡 方法 | ||
1.一種鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的SCAR分子標記，其特征在于，所述SCAR分子標記的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.權利要求1所述的SCAR分子標記在鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡中的應用。
3.一種鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的引物對，其特征在于，所述引物對包括：如SEQID No.2所示的正向引物和如SEQ ID No.3所示的反向引物。
4.權利要求3所述的引物對在鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡中的應用。
5.一種鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的制劑，其特征在于，所述制劑包括權利要求3所述的鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的引物對。
6.根據權利要求5所述的鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的制劑，其特征在于，所述制劑為試劑盒。
7.一種鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)、以待鑒定柴胡樣品的DNA為模板，權利要求3所述的引物對為引物，進行PCR擴增；
(2)、對PCR擴增產物進行電泳檢測，鑒定待鑒定柴胡樣品是否為竹葉柴胡或窄竹葉柴胡。
8.根據權利要求7所述的鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的方法，其特征在于，步驟(1)中所述PCR擴增的反應體系為：模板1.5μL～2.5μL、上游引物0.3μL～0.5μL、下游引物0.3μL～0.5μL；TaqMix 5μL～7μL；去離子水加至15μL。
9.根據權利要求7所述的鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的方法，其特征在于，步驟(1)中所述PCR擴增的反應程序為：94℃預變性，保持4min；94℃變性，保持30s，54℃退火，保持30s，72℃延伸，保持1min，共35個循環；72℃保持8min。
10.根據權利要求7所述的鑒定竹葉柴胡和/或窄竹葉柴胡的方法，其特征在于，步驟(2)中，若PCR擴增產物出現150bp特異性條帶，待鑒定柴胡樣品為竹葉柴胡或窄竹葉柴胡。
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