[發(fā)明專利]糖基化位點(diǎn)阻斷/蛋白固定化磁性納米顆粒

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210150392.4
• 申請日: 2022-02-18
• 公開（公告）號: CN114441775A
• 公開（公告）日: 2022-05-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王涎樺;董林毅;白晨晨
• 申請（專利權(quán)）人: 天津醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/543;G01N33/533;G01N33/532
• 代理公司: 天津創(chuàng)信方達(dá)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 12247
• 代理人: 李京京

1.一種糖基化位點(diǎn)阻斷/蛋白固定化的磁性納米顆粒，其特征在于，所述磁性納米顆粒為表面使用掩蔽劑阻斷糖基化位點(diǎn)的磁性納米顆粒；

優(yōu)選地，所述掩蔽劑為苯硼酸類化合物；

優(yōu)選地，所述苯硼酸類化合物選自4-乙基苯硼酸、4-甲基苯硼酸、4-氟苯硼酸、4-三氟甲基苯硼酸、4-羥基苯硼酸、2,3-二氟苯硼酸、3,5-二氟苯硼酸、3,4,5-三氟苯硼酸、2,3,5,6-四氟苯硼酸或五氟苯硼酸；

優(yōu)選地，所述苯硼酸類化合物選自2,3-二氟苯硼酸、3,5-二氟苯硼酸、3,4,5-三氟苯硼酸、2,3,5,6-四氟苯硼酸或五氟苯硼酸；

優(yōu)選地，所述苯硼酸類化合物為五氟苯硼酸；

優(yōu)選地，所述磁性納米顆粒為二氧化硅層包裹的四氧化三鐵磁性納米顆粒；

優(yōu)選地，所述磁性納米顆粒表面進(jìn)行了氨基化修飾；

優(yōu)選地，所述磁性納米顆粒表面進(jìn)行了醛基化修飾；

優(yōu)選地，所述醛基連接在氨基上；

優(yōu)選地，所述磁性納米顆粒表面連接有抗原；

優(yōu)選地，所述磁性納米顆粒表面使用封閉劑鈍化活性位點(diǎn)；

優(yōu)選地，所述封閉劑選自脫脂奶粉、血清白蛋白、明膠或酪蛋白；

優(yōu)選地，所述封閉劑為血清白蛋白。

2.一種糖基化位點(diǎn)阻斷/蛋白固定化的磁性納米顆粒的制備方法，其特征在于，包括：

1)制備二氧化硅層包裹的磁性納米顆粒；

2)將二氧化硅層包裹的納米顆粒進(jìn)行氨基化修飾，制備氨基功能化的磁性納米顆粒；

3)將氨基功能化的磁性納米顆粒進(jìn)行醛基化修飾，制備醛基功能化的磁性納米顆粒；

4)將醛基功能化的磁性納米顆粒分散在抗原溶液中，制備抗原固定的磁性納米顆粒；

5)將抗原固定的磁性納米顆粒分散在封閉劑溶液中，制備活性位點(diǎn)鈍化的磁性納米顆粒；

6)將活性位點(diǎn)鈍化的磁性納米顆粒分散到掩蔽劑溶液中，制備糖基化位點(diǎn)阻斷/蛋白固定化磁性納米顆粒；

優(yōu)選地，所述磁性納米顆粒為四氧化三鐵磁性納米顆粒；

優(yōu)選地，述掩蔽劑為苯硼酸類化合物；

優(yōu)選地，所述苯硼酸類化合物選自4-乙基苯硼酸、4-甲基苯硼酸、4-氟苯硼酸、4-三氟甲基苯硼酸、4-羥基苯硼酸、2,3-二氟苯硼酸、3,5-二氟苯硼酸、3,4,5-三氟苯硼酸、2,3,5,6-四氟苯硼酸或五氟苯硼酸；

優(yōu)選地，所述苯硼酸類化合物選自2,3-二氟苯硼酸、3,5-二氟苯硼酸、3,4,5-三氟苯硼酸、2,3,5,6-四氟苯硼酸或五氟苯硼酸；

優(yōu)選地，所述苯硼酸類化合物為五氟苯硼酸；

優(yōu)選地，糖基化位點(diǎn)阻斷/蛋白固定化磁性納米顆粒的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)如下：

活性位點(diǎn)鈍化的磁性納米顆粒：78.00-86.00％

掩蔽劑：0.09-0.32％

磷酸二氫鈉：0.37-0.75％

磷酸氫二鈉：0.73-1.50％

雙蒸水：8.60-17.50％。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟1)制備二氧化硅層包裹的磁性納米顆粒方法如下：

按計(jì)量將磁性納米顆粒分散在無水乙醇中，隨后加入雙蒸水和氨水，混合均勻后加入四乙氧基硅烷反應(yīng)，反應(yīng)完成后進(jìn)行洗滌，干燥得到二氧化硅層包裹的磁性納米顆粒；

優(yōu)選地，反應(yīng)采用超聲3-5h；

優(yōu)選地，洗滌采用無水乙醇和雙蒸水交替洗滌；

優(yōu)選地，干燥采用烘箱減壓干燥；

優(yōu)選地，各組分的質(zhì)量百分比如下：

四氧化三鐵磁性納米顆粒：80.10-88.50％

四乙氧基硅烷：1.20-2.20％

無水乙醇：9.10-17.60％

氨水：0.11-0.19％

雙蒸水：4.20-11.40％。