[發明專利]一種蒜氨酸的分離純化方法

有效

• 申請號: 202210144624.5
• 申請日: 2022-02-17
• 公開（公告）號: CN114478331B
• 公開（公告）日: 2023-08-11
• 發明（設計）人: 盧艷敏;崔波;王娜;柴晴晴
• 申請（專利權）人: 齊魯工業大學
• 主分類號: C07C315/06
• 分類號: C07C315/06;C07C317/48
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所 37218
• 代理人: 李桂存

1.一種蒜氨酸的分離純化方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）采用硫酸銨、氯化鈉、正丙醇、pH?為2.4伯瑞坦-羅比森緩沖溶液組成的雙水相體系，處理滅酶蒜粉，下相即為粗提液；

（2）向步驟（1）的粗提液通過醇沉除去多糖、無機鹽，離心，將上清液減壓回收乙醇，烘干，得蒜氨酸粗提物固體粉末；

（3）采取30%磷酸二氫鈉-乙醇-丙酮為溶劑體系，取步驟（2）的固體粉末加入到已達到平衡之后的溶劑系統中，并超聲使其完全溶解后，從進樣閥中注入高速逆流色譜儀，采用高速逆流色譜儀進行純化；

所述步驟（1）中雙水相體系為：19%?(w/w)?硫酸銨/8.54%?(w/w)?氯化鈉?/20%?(w/w)正丙醇/?pH?為?2.4伯瑞坦-羅比森緩沖溶液組成的雙水相體系；

所述步驟（3）中高速逆流色譜儀的具體參數為：將固定相以?20?m?L/min?的流速泵入高速逆流色譜儀的螺旋管中，待固定相充滿螺旋管后，開啟高速逆流色譜儀，調整轉速為1050?rpm，同時流動相以?1.8?m?L/min?的流速泵入充滿固定相后的螺旋管中，待末端有流動相流出時，即螺旋管中上下相已達到動態平衡：然后將備好的樣品溶液從進樣閥中注入高速逆流色譜儀，經過高速逆流色譜分離后，在?25~30?min?收集到目標餾分。

2.根據權利要求1所述的蒜氨酸的分離純化方法，其特征在于，步驟（3）溶劑體系的30%磷酸二氫鈉-乙醇-丙酮的體積比為6:3:1.5。

3.根據權利要求1所述的蒜氨酸的分離純化方法，其特征在于，步驟（3）的溶劑體系平衡后分為上下兩相，上相作為高速逆流色譜儀的固定相，下相為高速逆流色譜儀的流動相。

4.根據權利要求3所述的蒜氨酸的分離純化方法，其特征在于，步驟（2）的固體粉末加入到已達到平衡之后的上、下兩相溶劑系統，并超聲使其完全溶解；所述的固體粉末與上、下兩相溶劑的加入量比值為400mg:10mL:10mL。