[發(fā)明專利]一種多核苷酸、載體元件及表達(dá)載體和宿主細(xì)胞及應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210140323.5
• 申請(qǐng)日: 2022-02-16
• 公開（公告）號(hào): CN114540352A
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 金偉剛;董庸行;宋彥凌
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 艾瑞生命科學(xué)技術(shù)（常州）有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/113
• 分類號(hào): C12N15/113;C12N15/85;C12N15/66;C12N15/67;C12N5/10;C07K14/82;C07K14/71;C12N9/12
• 代理公司: 蘇州創(chuàng)元專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 32103
• 代理人: 俞春雷

1.一種多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸包括如SEQ ID NO.1和/或SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸包括如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

3.一種載體元件，其特征在于，包括如權(quán)利要求1或2所述的多核苷酸。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的載體元件，其特征在于，包括啟動(dòng)子，所述多核苷酸位于所述啟動(dòng)子的上游。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的載體元件，其特征在于，所述啟動(dòng)子為選自CMV、EEF1A1、mPGK、hPGK、SV40中的一種。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的載體元件，其特征在于，包括開放閱讀框，所述開放閱讀框位于所述多核苷酸的下游。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的載體元件，其特征在于，所述開放閱讀框位于所述啟動(dòng)子的下游。

8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的載體元件，其特征在于，所述載體元件依次包括多核苷酸、啟動(dòng)子和開放閱讀框。

9.一種表達(dá)載體，其特征在于，所述表達(dá)載體包括如權(quán)利要求3-8任意一項(xiàng)所述的載體元件。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的表達(dá)載體，其特征在于，所述表達(dá)載體為質(zhì)粒。

11.如權(quán)利要求9或10所述的表達(dá)載體，其特征在于，所述表達(dá)載體通過如下構(gòu)建方法得到：

獲得核苷酸SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2的序列，完成相對(duì)應(yīng)序列的基因合成；將核苷酸SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2序列進(jìn)行拼接并與pEm載體進(jìn)行拼接，得到空載體；利用所述空載體進(jìn)行單克隆抗體表達(dá)載體的構(gòu)建；對(duì)構(gòu)建完成的所述表達(dá)載體通過PvuI酶切制備線性化質(zhì)粒。

12.一種宿主細(xì)胞，其特征在于，所述宿主細(xì)胞中含有或者整合有如權(quán)利要求9-11任意一項(xiàng)所述的表達(dá)載體。

13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的宿主細(xì)胞，其特征在于，所述宿主細(xì)胞為哺乳類細(xì)胞。

14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的宿主細(xì)胞，其特征在于，所述宿主細(xì)胞為選自CHO細(xì)胞、NSO細(xì)胞、SP2/0細(xì)胞、HEK細(xì)胞中的一種或上述細(xì)胞的延伸細(xì)胞系中的一種。

15.一種根據(jù)權(quán)利要求12-14任意一項(xiàng)所述的宿主細(xì)胞在生產(chǎn)蛋白中的應(yīng)用。