[發明專利]一種大腸埃希氏菌多重耐藥性檢測方法及應用

在審

• 申請號: 202210130099.1
• 申請日: 2022-02-11
• 公開（公告）號: CN114438237A
• 公開（公告）日: 2022-05-06
• 發明（設計）人: 趙芳;趙細應;王晶;白爽
• 申請（專利權）人: 深圳市檢驗檢疫科學研究院;深圳海關食品檢驗檢疫技術中心;中山大學孫逸仙紀念醫院
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/10;C12R1/19
• 代理公司: 深圳中圳知識產權代理事務所(普通合伙) 44768
• 代理人: 廖苑濱

1.一種大腸埃希氏菌多重耐藥性檢測方法，其特征在于，包括以下步驟，

S1：提取大腸埃希氏菌；

S2：將大腸埃希氏菌采用探針進行標記

S3：在標記后的大腸埃希氏菌中加入藥物進行耐藥性檢測。

2.根據權利要求1所述的大腸埃希氏菌多重耐藥性檢測方法，其特征在于，在步驟S1之前，還需要制備基因芯片；

和/或，所述基因芯片的制備方法包括以下步驟，

將大腸埃希氏菌病原體DNA抽取后置于芯片中進行雜交、顯色，得到基因芯片。

3.根據權利要求1所述的大腸埃希氏菌多重耐藥性檢測方法，其特征在于，所述基因芯片為大腸埃希氏菌DNA芯片；

和/或，所述芯片包括硅片、玻片或尼龍膜中的一種。

4.根據權利要求1所述的大腸埃希氏菌多重耐藥性檢測方法，其特征在于，所述探針包括VT1探針、VT2探針、EAE基因探針、Stx1探針、Stx2探針、HlyC探針、HlyA探針、HlyB探針和HlyD探針。

5.根據權利要求1-4任一項所述的大腸埃希氏菌多重耐藥性檢測方法，其特征在于，所述藥物為抗生素；

和/或，所述抗生素包括青霉素、左氧氟沙星、頭孢菌素或硝基咪唑類中的一種或多種。

6.根據權利要求1所述的大腸埃希氏菌多重耐藥性檢測方法，其特征在于，所述提取大腸埃希氏菌的方法包括以下步驟，

S11：細菌分離；

S12：提取DNA；

S13：多重PCR擴增。

7.根據權利要求6所述的大腸埃希氏菌多重耐藥性檢測方法，其特征在于，提取DNA的方法，包括以下步驟，

制備菌懸液進行離心，然后取其上清液加入核酸提取液進行混合、水浴離心，得到的上清液為提取后的DNA溶液。

8.根據權利要求7所述的大腸埃希氏菌多重耐藥性檢測方法，其特征在于，所述菌懸液為細菌分離后的大腸埃希氏菌。

9.根據權利要求2所述的大腸埃希氏菌多重耐藥性檢測方法，其特征在于，進行多重PCR擴增的裝置為多重PCR試劑盒。

10.一種權利要求1-9任一項所述大腸埃希氏菌多重耐藥性檢測方法在動物源或植物源中的應用。