[發明專利]一種超強動力波集成多聚酶提取牡蠣肽方法

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• 申請號: 202210128757.3
• 申請日: 2022-02-11
• 公開（公告）號: CN114395604A
• 公開（公告）日: 2022-04-26
• 發明（設計）人: 江銘福;江新輝;潘超然;江敏
• 申請（專利權）人: 福建大眾健康生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/34;C07K1/14
• 代理公司: 北京成高專利代理事務所(普通合伙) 16047
• 代理人: 姚燕春

本發明公開了一種超強動力波集成多聚酶提取牡蠣肽方法，該方法包括如下步驟：將牡蠣殼去掉、沖洗、瀝干，后將瀝干牡蠣與濃度95％的NaOH水溶液進行混合浸泡3?5小時，除掉牡蠣的表面灰分和脂肪，隨后使用去離子純水沖洗干凈，瀝干；將預處理好的牡蠣送入密閉熬煮罐高溫熬煮(110℃)3小時，待牡蠣熬煮破損后，降溫至50?55℃，采用三次多種生物酶集成強動力波進行高效水解；酶解4小時后，采用酶解過程和納濾膜分離協同進行的工藝技術進行純化提取，得到純度大于90％的小分子牡蠣膠原蛋白肽。本發明采用酶解過程和納濾膜分離協同進行的工藝技術進行純化提取，能夠得到純度大于90％、相對分子質量小于1.0kD的小分子牡蠣膠原蛋白肽。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體為一種超強動力波集成多聚酶提取牡蠣肽方法。

背景技術

膠原蛋白是一種由動物細胞表達的天然生物高分子，作為細胞外基質的主要成分幾乎存在于所有組織，約占動物體內總蛋白的70％。在表皮、內臟、軟骨和其它結締組織中含量較高，在動物真皮層，膠原蛋白含量超過在其它組織中的膠原蛋白。原膠原在生物酶的催化作用下去除端肽后形成膠原蛋白。膠原蛋白熱變性后形成的分子量不均一的多肽混合物稱為明膠，膠原蛋白直接經過化學和酶法降解后的多肽和小分子肽。

牡蠣是蛋白肽的制備來源之一，而如何從牡蠣中提取制備出純度較高、相對分子質量小的蛋白肽是一個技術難題。

基于此，本發明設計了一種超強動力波集成多聚酶提取牡蠣肽方法。

本發明采用三次多種生物酶集成強動力波進行高效水解提取；1、第一次單獨將牡蠣通中性蛋白酶和堿性蛋白酶降解成水解液；2、第二次將牡蠣水解液再次通過風味蛋白酶和外切蛋白酶進行水解，然后結合微波催化處理，將微波超強射線于水解液并透過細胞壁達到細胞內部使其破裂，釋放有效成分； 3、第三次將混合液通內切蛋白酶和胰蛋白酶結合超聲波空化應力作用，從而強力再次破壞細胞壁結構，使有效成分得以完全釋放、提取。通過上面的多次生物酶解和強力波集成分離技術，使牡蠣蛋白肽完全得到提取。

發明內容

本發明的目的在于提供一種超強動力波集成多聚酶提取牡蠣肽方法，以解決上述背景技術中提出的牡蠣是蛋白肽的制備來源之一，而如何從牡蠣中提取制備出純度較高、相對分子質量小的蛋白肽是一個技術難題的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：一種超強動力波集成多聚酶提取牡蠣肽方法，該方法包括如下步驟：

第一步：預處理牡蠣(去殼)：將牡蠣殼去掉、沖洗、瀝干，后將瀝干牡蠣與濃度95％的NaOH水溶液進行混合浸泡3-5小時，除掉牡蠣的表面灰分和脂肪；隨后使用去離子純水沖洗干凈，瀝干；

第二步：將預處理好的牡蠣送入密閉熬煮罐高溫熬煮(110℃)3小時，待牡蠣熬煮破損后，降溫至50-55℃，之后采用三次多種生物酶集成強動力波進行高效水解：第一次在牡蠣中添加中性蛋白酶和堿性蛋白酶降解成水解液；之后將牡蠣水解液再次通過風味蛋白酶和外切蛋白酶進行水解，然后結合微波催化處理，將微波超強射線于水解液并透過細胞壁達到細胞內部使其破裂，釋放有效成分；再將混合液通內切蛋白酶和胰蛋白酶結合超聲波空化應力作用，從而強力再次破壞細胞壁結構，使有效成分得以完全釋放；

第三步：酶解4小時后，采用酶解過程和納濾膜分離協同進行的工藝技術進行純化提取，得到純度大于90％的小分子牡蠣膠原蛋白肽；

第四步：分離結束后進行升溫(85-90℃)滅酶，得到純度大于90％、相對分子質量小于1.0kD的小分子牡蠣膠原蛋白肽溶液；

第五步：將獲得的納米級牡蠣肽溶液送入濃縮罐中進行濃縮，濃酸到固體濃度含28-30％時，送入噴霧干燥塔快速干燥蛋白肽溶液，得到小分子牡蠣膠原蛋白肽粉成品。

作為本發明的進一步方案，第一步混合浸泡中瀝干牡蠣與濃度95％的NaOH水溶液的固液比為1:3。