[發明專利]一種兼具抗氧化及ACE抑制功能多肽及制備方法和用途

在審

• 申請號: 202210118969.3
• 申請日: 2022-02-08
• 公開（公告）號: CN114381487A
• 公開（公告）日: 2022-04-22
• 發明（設計）人: 孟凡菊
• 申請（專利權）人: 安徽大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;A61K38/01;A61P39/06;A61P9/12
• 代理公司: 石家莊嘉宏智信知識產權代理有限公司 13160
• 代理人: 胡利娟

本發明公開了一種兼具抗氧化及ACE抑制功能多肽及制備方法和用途。本發明中，取干燥的金福菇子實體，用粉碎機打成粉末，過夜后加入按體積的80％的硫酸銨，放置4℃冰箱中12h，之后于超高速離心機中4℃以15000×g的轉速離心15min得到沉淀，用3500Da的透析袋透析掉無機鹽離子，凍干即為蛋白樣品，而后進行液相進行純化樣品，通過體外清除自由基實驗發現多肽具有很好的抗氧化活性；通過對ACE抑制實驗發現，具有較高的抑制活性。目前查閱資料中，尚未發現該金福菇功能多肽活性的相關報道，其在醫藥前景十分廣闊。

技術領域

本發明屬于農產品精深加工技術領域，具體為一種兼具抗氧化及ACE抑制功能多肽及制備方法和用途。

背景技術

人類的很多疾病與體內自由基的產生密切相關，這些自由基通過攻擊機體組織，造成DNA，蛋白質和膜脂質的氧化損傷，引發一系列的鏈反應，進而損傷機體的各項器官，造成代謝性損傷。因此尋找新型抗氧化劑，具有重要意義。

目前治療高血壓的藥物，如卡托普利，可以有效地抑制ACE的活性,降低血壓,但是其有明顯的副作用，長期服用會導致降壓過度、泌尿系統病變、咳嗽、味覺失真及血管神經性水腫等。因此，ACE抑制劑研究應運而生。ACE抑制劑來源天然，毒性小，吸收好，為治療高血壓提供了另一條出路，目前，ACE抑制劑的研究主要集中在大豆，玉米，海鮮等方面，而關于食用菌子實體分離純化ACE抑制肽，較少。

食用菌因其具有豐富的營養價值，近幾年來，越來越受到科研工作者的重視。隨著研究的深入，食用菌多糖諸多生物活性已逐漸被人們認知，如抗氧化、抗病毒、免疫調節、抗腫瘤、抗衰老、調節腸道菌群、抗疲勞、降血糖、降血脂等。蛋白活性主要集中在抗炎，多肽抗氧化等方面，而關于食用菌多肽兼具抗氧化及ACE抑制活性方面的報道幾乎沒有。金福菇(Tricholoma lobayense)，擔子菌門，傘菌綱，傘菌目，口蘑科，香菇屬，又名大白口蘑，是一種正處于開發階段的高溫型珍稀食用菌，基于本實驗室對金福菇多糖的研究發現TLH-3具有與Vc活性相當的抗氧化效果并且無毒副作用。而在干重比例中，蛋白的含量僅次于多糖，目前對其研究主要集中于多糖及菌絲體蛋白的生物活性研究，關于子實體功能多肽的相關研究尚無報道，因此金福菇子實體蛋白具有廣闊的研究前景。

發明內容

本發明的目的在于：為了解決上述提出的問題，提供一種兼具抗氧化及ACE抑制功能多肽及制備方法和用途。

本發明采用的技術方案如下：一種兼具抗氧化及ACE抑制功能多肽的制備方法，所述兼具抗氧化及ACE抑制功能多肽及其制備方法包括以下步驟：

S1:取干燥的金福菇子實體，用粉碎機打成粉末；

S2:控制料液比為1:15加入5％的冰醋酸；

S3:控制溫度為4℃過夜后加入按體積的80％的硫酸銨，放置4℃冰箱中12h；

S4:之后于超高速離心機中4℃以15000×g的轉速離心15min得到沉淀；

S5:用3500Da的透析袋透析掉無機鹽離子，凍干即為蛋白樣品；

S6:提取的蛋白樣品，加入酶，調節緩沖液的pH，酶解時間及溫度得到相應的水解樣品；

S7:取步驟S5中制得的樣品進行分離純化，用截留量5kDa的超濾膜進行分離，得到5000Da以下的樣品，而后進行液相進行純化樣品。

在一優選的實施方式中，所述步驟S1中，5％的冰醋酸中含有0.1％的β-巰基乙醇。

在一優選的實施方式中，所述步驟S6中，酶的為絲氨酸蛋白酶，包括但不限于地衣桿菌蛋白酶、凝血酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、彈性蛋白酶。

在一優選的實施方式中，所述步驟S6中加入酶的量為4％～8％；所述的緩沖液pH為8.5～10.5。