[發(fā)明專利]一種制備可控制分子量的α葡聚糖工藝

在審

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• 申請日: 2022-02-07
• 公開（公告）號: CN114438050A
• 公開（公告）日: 2022-05-06
• 發(fā)明（設計）人: 林博;李蠡;靳夢瀟
• 申請（專利權）人: 蓓斯蒂（海口）生命科技有限公司
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12N11/00;C12N9/90;C12P19/08;C12P19/18;C12P19/24;C08B37/02
• 代理公司: 北京聯(lián)瑞聯(lián)豐知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 11411
• 代理人: 黃冠華

本發(fā)明公開了一種制備可控制分子量的α葡聚糖工藝，包括蔗糖、葡萄糖、葡聚糖蔗糖酶、果糖異構化酶、水、副產(chǎn)物阿洛酮糖等，首先將蔗糖加水配置成蔗糖水溶液。然后將葡聚糖蔗糖酶固定化后放入蔗糖水溶液，進行酶反應。根據(jù)分子量要求進行控制反應時間，酶添加量，溫度，PH控制，反應終止然后進行樹脂脫鹽處理，利用色譜分離或者膜分離的方法分離果糖，對產(chǎn)物進行進一步的處理，再次進行脫鹽脫色處理、膜分離或色譜分離進行純化得到≥90以上純度的α葡聚糖，將得到的產(chǎn)物進行濃縮、除菌處理得到水溶性高純度α葡聚糖且分子量可以在1000?20000道爾頓精準控制；本一種制備可控制分子量的α葡聚糖工藝具有精準化控制、聚合反應和提取工藝可調、生產(chǎn)成本低的優(yōu)點。

技術領域

本發(fā)明涉及聚合反應技術領域，具體為一種制備可控制分子量的α葡聚糖工藝。

背景技術

本技術采用畢赤酵母發(fā)酵產(chǎn)生的葡聚糖蔗糖酶，以蔗糖為底物，將蔗糖拆分葡萄糖和果糖。葡萄糖在聚合，形成α-1，6糖苷鍵，根據(jù)反應條件的調節(jié)，可以得到不同分子量的α-葡聚糖，分子量從1000-20000不等。

本技術在特殊條件下聚合成分子量500-5000分子量，且形成的糖苷鍵100%為α-1，6型的水溶性低聚α葡聚糖，副產(chǎn)物為果糖，副產(chǎn)物阿洛酮糖在經(jīng)過果糖異構酶異構形成D-阿洛酮糖。與傳統(tǒng)技術相比本技術副產(chǎn)物為附加值更高的D-阿洛酮糖，而且傳統(tǒng)技術對于分子量的控制卻并不能如本發(fā)明一樣便于控制，且新技術成本低使用固定化酶技術。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于提供一種制備可控制分子量的α葡聚糖工藝，具有精準化控制、聚合反應和提取工藝可調、生產(chǎn)成本低的優(yōu)點，解決了現(xiàn)有技術中的問題。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術方案：包括蔗糖、葡萄糖、葡聚糖蔗糖酶、果糖異構化酶、水、副產(chǎn)物阿洛酮糖等。

制備方法一：

（1）.首先將蔗糖加水配置成蔗糖水溶液。

（2）.然后將葡聚糖蔗糖酶固定化后放入蔗糖水溶液，進行酶反應。根據(jù)分子量要求進行控制反應時間，酶添加量，溫度，PH控制，反應終止然后進行樹脂脫鹽處理。

（3）.利用色譜分離或者膜分離的方法分離果糖。

（4）.對產(chǎn)物進行進一步的處理，再次進行脫鹽脫色處理、膜分離或色譜分離進行純化得到≥90以上純度的α葡聚糖。

（5）將得到的產(chǎn)物進行濃縮、除菌處理得到水溶性高純度α葡聚糖且分子量可以在1000-20000道爾頓精準控制。

制備方法二：

（1）.首先將蔗糖加水配置成蔗糖水溶液。

（2）.然后將葡聚糖蔗糖酶固定化后放入蔗糖水溶液，進行酶反應。根據(jù)分子量要求進行控制反應時間，酶添加量，溫度，PH控制，反應終止然后進行樹脂脫鹽處理。

（3）.利用色譜分離或者膜分離的方法分離果糖。

（4）對果糖中加入果糖異構化酶進行處理，然后進行樹脂脫鹽、色譜分離處理。

（5）對反應后的產(chǎn)物進行除菌、濃縮得到最終產(chǎn)物70%含量的阿洛酮糖。

優(yōu)選的，上述步驟中的原料配置成溶液的終濃度為蔗糖100-200g/kg、葡聚糖100-200g/kg、水600-700g/kg、酶添加量50g/kg、副產(chǎn)物阿洛酮糖50-100g/kg、酶反應時間6-12小時。

與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的有益效果如下：

1.本一種制備可控制分子量的α葡聚糖工藝，采用高選擇性的葡聚糖蔗糖酶DS-LM，單位酶活≥25U/mg蛋白。和配套固定化酶技術，固定化蛋白收率60%±5%，10次內酶活衰減不超過50%。