[發明專利]一種可以用于血液檢測的PCR反應液及其試劑盒

在審

• 申請號: 202210113295.8
• 申請日: 2022-01-30
• 公開（公告）號: CN114134220A
• 公開（公告）日: 2022-03-04
• 發明（設計）人: 牟新濤;劉婉君;韓典霖;楊亮
• 申請（專利權）人: 濟凡生物科技（北京）有限公司
• 主分類號: C12Q1/686
• 分類號: C12Q1/686
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 趙靜

1.一種用于血液直接擴增的PCR反應液，包括Taq DNA聚合酶、緩沖體系、二價陽離子、一價陽離子、dNTPs、PCR 反應增強劑和PCR體系穩定劑；

2×所述PCR反應液，包括下述終濃度的物質：Tris-HCl緩沖液300mM、(NH4)₂SO₄ 20mM、MgCl₂ 6mM、Tween 20溶液（10%） 0.01%（v/v%）、dNTPs 0.6mM、KCl 100mM、10×PCR反應增強劑 20%（v/v%）、A112和A110 0.1U/μl，溶劑為dd H₂O；其中，Tris-HCl的pH值為8.5，所述A112和A110的酶活比為1:1；

所述的dNTPs包括dATP、dCTP、dGTP和dTTP；其中，dATP、dCTP、dGTP、dTTP的摩爾比為1：1：1：1；

所述的10×PCR反應增強劑，由下述終濃度的物質組成：甜菜堿3M、DMSO 3%（v/v%） 、明膠0.5%（w/w%）、ET SSB 0.5%（w/w%），溶劑為水；

所述的A110：為濟凡生物科技（北京）有限公司的產品GenFQ II Hot Start Taq DNAPolymerase，商品目錄號為A110-01或A110-02；

所述的A112：為濟凡生物科技（北京）有限公司的產品GenFQ Hot Start Taq DNAPolymerase，商品目錄號為A112-1或A112-2。

2.一種用于血液直接擴增的試劑盒，其包括權利要求1所述的PCR反應液。

3.權利要求1所述的PCR反應液或權利要求2所述的試劑盒在血液樣本擴增中的應用。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于：所述血液樣本為人血或豬血。

5.一種擴增血液樣本的方法，包括使用權利要求1所述的PCR反應液以血液為模板直接進行PCR反應，以獲得經過擴增的血液樣本。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于：所述PCR反應的反應體系中，血液的體積含量為0.08%～40%；

所述PCR反應的反應體系中，PCR反應液的體積含量為60%～99.2%。