[發明專利]一種酶法聯合微生物發酵制備大豆低聚肽的方法及其應用

有效

• 申請號: 202210106630.1
• 申請日: 2022-01-28
• 公開（公告）號: CN114181990B
• 公開（公告）日: 2023-09-05
• 發明（設計）人: 黃君陽;李滿園
• 申請（專利權）人: 廈門元之道生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C12P39/00;C07K1/30;C07K1/34;C07K1/36;A23L27/30;A23L29/00;A23L29/30;A23L33/18;A23P10/28;C12R1/125;C12R1/25;C12R1/645;C12R1/02
• 代理公司: 廈門市天富勤知識產權代理事務所(普通合伙) 35244
• 代理人: 唐紹烈

1.一種酶法聯合微生物發酵制備大豆低聚肽的方法，其特征在于，包括：

步驟一、大豆分離蛋白預處理：以大豆分離蛋白粉為原料，大豆分離蛋白按質量體積比1：8～1：10加入純化水，常溫下剪切30～60min，剪切速度600～1000r/min；得到蛋白勻漿液；

步驟二、復合酶酶解：在所述蛋白勻漿液中滴加堿液調節體系pH至8.0～8.5,采用復合酶A和復合酶B梯度酶解：先添加復合酶A，通過控制體系pH維持在8.0～8.5，酶解溫度50～60℃，酶解2～3小時；再加入復合酶B，酶解1～2小時，高溫滅菌，再降溫至30～38℃；得到復合酶酶解液；所述復合酶A或所述復合酶B為堿性蛋白酶Alcalase?2.4L、胰酶、膠原酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、風味蛋白酶中的任意一種酶與果膠酶的復合酶，復配比例為5：1；

步驟三、微生物發酵：控制發酵溫度30～38℃；在復合酶酶解液中加入碳源以及無機鹽氯化銨緩沖體系，再加入活性干酵母發酵發酵，活性干酵母添加質量按發酵液體積的0.05％～0.4％，發酵3～5h，控制酒精度1～3％Vol；再加入東方醋酸菌發酵，東方醋酸菌添加質量按發酵液體積的0.1％～1.0％，發酵1～3h，控制產乙酸5～20g/L；再加入枯草芽孢桿菌及植物乳酸菌發酵，枯草芽孢桿菌和植物乳酸菌添加質量按發酵液體積的0.1％～0.8％，發酵4～8h；東方醋酸菌產酸富集，待發酵體系的pH＝4.4～4.8，終止發酵；枯草芽孢桿菌和植物乳酸菌的質量組分比為2：1；

步驟四、分離純化：發酵結束后滅菌，通過東方醋酸菌代謝產酸的富集讓分散型的蛋白變性沉淀，離心機分離2000～4000r/min，得到發酵清液和固體渣，所述固體渣通過高溫滅菌，凍干后，得到大豆發酵粉；所述發酵清液通過活性炭脫色脫味、板框過濾、納濾脫鹽濃縮、UHT殺菌、噴霧干燥工序，得到大豆低聚肽。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟二中，所述復合酶A添加量為大豆分離蛋白粉質量的0.8％～2.0％，所述復合酶B添加量為大豆分離蛋白粉質量的0.3％～1.0％。

3.一種組合物，其特征在于，包括以下重量份數的組分：如任一權利要求1-2所述的大豆發酵粉25～35份、多聚果糖15～25份、桑葚發酵粉15～25份、β-環糊精10～15份、麥芽糊精10～15份、菊粉5～10份、維生素C1.5～2份。

4.一種組合物，其特征在于，包括以下重量份數的組分：如任一權利要求1-2所述的大豆低聚肽25～35份、山梨糖醇15～20份、低聚異麥芽糖15～20份、珠肽粉10～15份、燕麥10～15份、硬脂酸鎂1～5份、Na-CMC?1～5份。