[發明專利]一種超靈敏DNA-生物大分子傳感器、構建及其應用

在審

• 申請號: 202210100203.2
• 申請日: 2022-01-27
• 公開（公告）號: CN114487066A
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發明（設計）人: 劉培峰;李鳳琴;顧臻
• 申請（專利權）人: 上海市腫瘤研究所;浙江大學
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327
• 代理公司: 上海恒慧知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 31317
• 代理人: 鄔震中

1.一種超靈敏DNA-生物大分子傳感器，其特征在于：所述的DNA-生物大分子傳感器由溶液相、界面相和自組裝的金電極組成；

所述的溶液相是含有適配體(aptamer)/信號探針(signal)雙鏈的PBS緩沖溶液；

所述的自組裝的金電極是經末端修飾巰基的輔助探針(helper)自組裝的金電極；

所述的界面相是溶液相與上述電極之間的界面。

2.根據權利要求1所述的一種超靈敏DNA-生物大分子傳感器，所述的生物大分子為激素、蛋白。

3.根據權利要求1所述的一種超靈敏DNA-生物大分子傳感器，所述的適配體為與靶標生物大分子特異性結合的DNA或RNA。

4.根據權利要求1所述的一種超靈敏DNA-生物大分子傳感器，所述的適配體為TATGGTATGCTGTGTGGTATGGGGTGGCGTGCTCT；所述的信號探針為標記了電化學指示劑的DNA鏈：ACACAGCATACCATA；所述的輔助探針為修飾了巰基的DNA鏈：TATGGTATGCTGTGT。

5.根據權利要求1所述的平臺，其特征在于所述的溶液相中適配體/信號探針的摩爾濃度比為1:1～1:4，所述適配體/信號探針雙鏈濃度為10nM～50nM；所述的輔助探針自組裝濃度為0.1μM～1.5μM；所述金電極直徑為0.5～5mm。

6.根據權利要求1、2、3、4或5所述的傳感器的構建，其特征在于采用如下步驟：適配體預先與信號探針在室溫下雜交形成適配體/信號探針雙鏈結構，加入靶標生物大分子(target)后，生物大分子競爭性的與適配體結合形成適配體/靶標生物大分子復合物，信號探針被取代下來并進入界面相；信號探針與金電極上輔助探針雜交形成信號探針/輔助探針雙鏈結構，從而使電化學指示劑靠近電極表面，產生增強的電子傳遞速率，實現對生物大分子的檢測。

7.根據權利要求6所述的超靈敏DNA-生物大分子傳感器的構建，其特征在于所述的信號探針標記的電化學指示劑為亞甲基藍或二茂鐵。

8.根據權利要求6所述的超靈敏DNA-生物大分子傳感器的構建，其特征在于，所述輔助探針末端修飾巰基，室溫下輔助探針通過S-Au鍵在金電極上自組裝形成單分子層。

9.一種如權利要求1所述的超靈敏DNA-生物大分子傳感器在生物大分子檢測中的應用。

10.如權利要求所述的超靈敏DNA-生物大分子傳感器的應用，其特征在于癌癥樣本中標志物的檢測應用。