[發明專利]一種單糖的分析方法

在審

• 申請號: 202210097752.9
• 申請日: 2022-01-27
• 公開（公告）號: CN114577958A
• 公開（公告）日: 2022-06-03
• 發明（設計）人: 肖永成;林衛軍;石國良;王羽娟;張蕾;王建智
• 申請（專利權）人: 唐傳生物科技（廈門）有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/34;G01N30/74;G01N30/88;G01N30/89
• 代理公司: 廈門致群財富專利代理事務所(普通合伙) 35224
• 代理人: 鄧貴琴

本發明涉及一種單糖的分析方法。具體地，本發明提供一種用于測定單糖的HPLC方法。本發明所述的方法能夠同時對多種單糖進行定性和定量測定。

技術領域

本發明涉及醫藥和生物技術領域，具體涉及一種單糖的分析方法。

背景技術

糖類物質根據功能基團的不同，可分為醛糖、酮糖、糖醇和糖醛酸四大類；依據糖的還原氧化特性，又可以分成還原性糖和非還原性糖，醛糖屬于還原性糖，酮糖屬于非還原性糖；根據糖殘基數目的多少，糖類物質又可分為單糖、寡糖和多糖。單糖可以依照其碳數的不同分為丙糖、丁糖、戊糖、己糖和庚糖，常見的單糖有葡萄糖、半乳糖、甘露糖、果糖等。寡糖是由少數(2～6個)單糖縮合形成的聚合物，低聚糖通常是指20個以下的單糖縮合形成的聚合物，而多糖則由多單糖分子縮合、失水而成的。

現有技術中的菲林法、二硝基水楊酸法等化學分析方法以及電泳法、光度法等，由于無法對體系中的各種單糖進行預先分離，所以得到的只是單糖的總和。

由于單糖的極性較強，結構相近，且缺乏光學活性，因此，現有技術的單糖分析方法往往只是對一種單糖進行分析測定，在需要同時分析多種單糖的情況下例如用于糖的結構研究或對醫藥質控，對各個單糖進行單獨分析效率低下，無法滿足工業化需求。此外，現有的對多個單糖進行同時分離和測定的方法存在許多缺點，例如單糖無法實現與基線的有效分離，單糖的分離度低，各個單糖的標準曲線較差，檢出限和靈敏度低等等，從而難以有效的對多個單糖同時分離和測定，進而限制了對多種單糖的結構研究、定性定量和醫藥質控等等。

因此，本領域需要開發一種能夠同時對多種單糖進行測定的方法。

發明內容

本發明的目在提供一種能夠同時對多種單糖進行測定的HPLC方法。

本發明第一方面提供一種用于測定單糖的HPLC方法，所述的方法包括步驟：

(1)通過高效液相對樣品中的單糖進行測定；

所述的高效液相的色譜條件為：

色譜柱：反相色譜柱；

流動相：流動相A和流動相B，所述的流動相A包括乙腈；所述的流動相B包括檸檬酸鹽緩沖液和四氫呋喃的混合液；和

流動相洗脫：所述的流動相洗脫為梯度洗脫，所述的梯度洗脫的順序為：

其中，(v/v％)是指占流動相的體積分數，其中，0-25min時，流動相A(v/v％)的體積分數保持為1％，流動相B的體積分數保持為99％；25-30min時，流動相A(v/v％)的體積分數為從1％勻速上升到7％，流動相B(v/v％)的體積分數為從99％勻速下降到93％；30-56min時，流動相A(v/v％)的體積分數為從7％勻速下降到1％，流動相B(v/v％)的體積分數為從93％勻速上升到99％。

在另一優選例中，所述的方法為定量和/或定性方法。

在另一優選例中，所述的方法為體外方法。

在另一優選例中，所述的方法為非診斷性和非治療性方法。

在另一優選例中，所述樣品為水性樣品。

在另一優選例中，所述樣品為水溶液。

在另一優選例中，所述樣品包括單糖。

在另一優選例中，所述樣品包括單糖水溶液。

在另一優選例中，所述的單糖水溶液包括單糖和水。

在另一優選例中，所述的樣品包括單糖衍生物水溶液。

在另一優選例中，所述的單糖衍生物水溶液包括單糖衍生物和水。