[發明專利]一種基于比色法快速檢測柑橘黃龍病的試劑盒和方法

在審

• 申請號: 202210097151.8
• 申請日: 2022-01-26
• 公開（公告）號: CN114441520A
• 公開（公告）日: 2022-05-06
• 發明（設計）人: 鄧方坤;蔡德珍;危云云;歐陽智剛;王希;盧占軍;胡珊玲;劉新軍;徐梅;占軍平
• 申請（專利權）人: 江西新龍生物科技股份有限公司;江西省科學院應用化學研究所
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/01;G01N1/28
• 代理公司: 北京天盾知識產權代理有限公司 11421
• 代理人: 張彩珍

1.一種基于比色法快速檢測柑橘黃龍病的試劑盒，其特征在于，包括溶解液、淀粉顯色液、比色卡和檢測試紙；其中，所述檢測試紙為砂紙，所述比色卡包括不同淀粉濃度對應的顯色照片。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述溶解液包括醋酸鈉-醋酸緩沖溶液、磷酸二氫鉀-磷酸氫二鉀緩沖溶液、磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉緩沖溶液和乙醇水溶液中的一種或多種。

3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述淀粉顯色液包括碘酒、碘-碘化鉀溶液和聚乙烯吡咯烷酮碘中的一種或多種。

4.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述比色卡通過以下方法獲得：

稱取可溶性淀粉，用溶解液攪拌溶解，分別制成不同淀粉濃度的溶液，向每個濃度的淀粉溶液中滴加淀粉顯色液進行顯色，拍照制成不同淀粉濃度對應的顯色照片。

5.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述比色卡通過以下方法獲得：

稱取可溶性淀粉，用溶解液攪拌溶解分別制成淀粉濃度為0ppm～6000ppm的溶液，向每個濃度的淀粉溶液中滴加淀粉顯色液進行顯色，拍照，制成淀粉濃度為0ppm～6000ppm對應的顯色照片。

6.一種基于比色法快速檢測柑橘黃龍病的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1：摘取若干片疑似黃龍病樹的葉片，使用同一片檢測試紙的磨砂面在每片葉片上摩擦，使葉片的葉肉組織粘附于檢測試紙上；

步驟2：將粘附有葉肉組織的檢測試紙置于溶解液中，使得檢測試紙上的葉肉組織分散在溶解液中；

步驟3：向含有葉肉組織的溶解液中滴加淀粉顯色液，使溶解液中的葉肉組織與淀粉顯色液混合顯色；

步驟4：將步驟3中溶解液的顯色與比色卡中不同淀粉濃度對應的顯色照片進行對比，得到疑似黃龍病樹葉片中的淀粉濃度，若葉片中的淀粉濃度大于或等于淀粉判定邊界值，則判定為陽性；若葉片中的淀粉濃度小于淀粉判定邊界值，則判定為陰性。

7.根據權利要求6所述的快速檢測柑橘黃龍病的方法，其特征在于，所述步驟1中若干片的葉片為1～5片。

8.根據權利要求6所述的快速檢測柑橘黃龍病的方法，其特征在于，所述步驟1包括：使用同一片檢測試紙的磨砂面在每片葉片的正面或背面上摩擦10～20次。

9.根據權利要求6所述的快速檢測柑橘黃龍病的方法，其特征在于，所述步驟4中淀粉判定邊界值為3000ppm。