[發明專利]一種可控IL-4緩釋聚乳酸多孔微球載體材料及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202210091375.8
• 申請日: 2022-01-26
• 公開（公告）號: CN114404662B
• 公開（公告）日: 2022-12-20
• 發明（設計）人: 孫揚;余優成;崔文國;劉文娟;楊斐;周倩蓉;杜亞偉;吳興文;李瑞雪;宋亮;孫健;畢瑋
• 申請（專利權）人: 復旦大學附屬中山醫院
• 主分類號: A61L27/18
• 分類號: A61L27/18;A61L27/54;A61L27/16;A61L27/56
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 翁若瑩

1.一種可控IL-4緩釋聚乳酸多孔微球載體材料，其特征在于，為一種負載有IL-4的聚乳酸多孔微球，所述的IL-4是由負載有IL-4的脂質體進行NHS-酯表面修飾后與胺化的聚乳酸多孔微球通過化學接枝生成酰胺鍵進行負載的。

2.如權利要求1所述的可控IL-4緩釋聚乳酸多孔微球載體材料，其特征在于，所述聚乳酸多孔微球是以聚乳酸和聚乙烯醇為原料通過微流控技術制備而成，所述的聚乳酸為左旋聚乳酸PLLA、右旋聚乳酸PLDA和外消旋聚乳酸PDLLA中的至少一種。

3.如權利要求1所述的可控IL-4緩釋聚乳酸多孔微球載體材料，其特征在于，所述脂質體由卵磷脂、三油精和膽固醇組成，所述NHS-酯的表面修飾所采用的NHS-酯為DSPE-PEG-NHS，其中，PEG的分子量為2000～5000。

4.權利要求1～3中任意一項所述的可控IL-4緩釋聚乳酸多孔微球載體材料的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟1：采用微流控技術將含聚乳酸和聚乙烯醇的乳液制備成聚乳酸微液滴，該聚乳酸微液滴依次經過固化、破乳、洗滌、干燥后制得聚乳酸多孔微球；

步驟2：將步驟1制備所得的聚乳酸多孔微球與含六亞甲基二胺的溶液通過氨解反應進行胺基化，得到胺化的聚乳酸多孔微球；

步驟3：將IL-4水溶液和含脂質體的溶液攪拌下乳化，得到負載有IL-4的脂質體乳液，隨后，加入含有DSPE-PEG-NHS的葡萄糖溶液攪拌乳化，再依次經過溶劑分離和純化步驟得到NHS-酯修飾的IL-4脂質體；

步驟4：將胺化的聚乳酸多孔微球與NHS-酯修飾的IL-4脂質體在PBS緩沖液中攪拌反應，即得可控IL-4緩釋聚乳酸多孔微球載體材料。

5.如權利要求4所述的可控IL-4緩釋聚乳酸多孔微球載體材料的制備方法，其特征在于，所述步驟1中含聚乳酸和聚乙烯醇的乳液是由聚乳酸的二氯甲烷溶液和聚乙烯醇的水溶液通過超聲振動乳化后制得；所述制備聚乳酸微液滴采用具有同軸雙通道的微流控裝置進行制備，具體過程包括：以聚乙烯醇水溶液為連續相，通入同軸雙通道的外通道，含聚乳酸和聚乙烯醇的乳液為分散相，通入同軸雙通道的內通道，所述連續相與流動相的流速比設為20:1。

6.如權利要求4所述的可控IL-4緩釋聚乳酸多孔微球載體材料的制備方法，其特征在于，所述步驟1中固化的條件為：在冰水凝固浴中攪拌過夜；所述破乳的條件為：在40～50℃的溫水中攪拌2～4h；所述洗滌的條件為：采用ddH₂O洗滌多次；所述干燥的條件為：冷凍干燥。

7.如權利要求4所述的可控IL-4緩釋聚乳酸多孔微球載體材料的制備方法，其特征在于，所述步驟2中含六亞甲基二胺的溶液為六亞甲基二胺的異丙醇溶液，所述氨解反應的條件為：溫度36～38℃，時間20～40min；所述氨解反應后還包括將氨解反應所得混合物依次進行離心、洗滌和干燥的步驟。

8.如權利要求4所述的可控IL-4緩釋聚乳酸多孔微球載體材料的制備方法，其特征在于，所述步驟3中IL-4水溶液的濃度為15～25μg/mL；所述含脂質體的溶液為含有卵磷脂、三油精和膽固醇的氯仿溶液，所述卵磷脂、三油精和膽固醇的質量比為7:2:1，所述卵磷脂、三油精和膽固醇的濃度總和為1～1.5mg/mL；所述IL-4水溶液與含脂質體的溶液的體積比為0.5～1.5：2。

9.如權利要求8所述的可控IL-4緩釋聚乳酸多孔微球載體材料的制備方法，其特征在于，所述步驟3中的葡萄糖溶液含有40～60μg/mL的DSPE-PEG-NHS和3～5wt％的葡萄糖；所述含有DSPE-PEG-NHS的葡萄糖溶液與負載有IL-4的脂質體乳液的質量比為1～1.5:1。