[發(fā)明專(zhuān)利]斑石鯛雌雄遺傳性別的特異性標(biāo)記及鑒定方法和試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210088031.1
• 申請(qǐng)日: 2022-01-26
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114107522B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-05-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 肖永雙;馬玉婷;李軍;肖志忠;吳燕鐸;趙海霞;馬道遠(yuǎn)
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院海洋研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/6888
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/6888;C12Q1/6879;C12N15/11
• 代理公司: 沈陽(yáng)科苑專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司 21002
• 代理人: 李穎

1.一種斑石鯛雌雄遺傳性別的特異性標(biāo)記，其特征在于，斑石鯛雌魚(yú)與雄魚(yú)染色體的特異性標(biāo)記的核苷酸序列為SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示堿基。

2.按權(quán)利要求1所述的斑石鯛雌雄遺傳性別的特異性標(biāo)記，其特征在于，所述斑石鯛雌魚(yú)與雄魚(yú)染色體的特異性標(biāo)記SEQ ID NO:1所示堿基為斑石鯛雌魚(yú)X₁染色體與斑石鯛雄魚(yú)異形染色體Y同源片段，為斑石鯛雌、雄遺傳性別共有DNA特征標(biāo)記；且，所述SEQ ID NO:1所示堿基序列第164位點(diǎn)和221位點(diǎn)之間插入序列片段，即為SEQ ID NO:2所示堿基序列，其為斑石鯛雄魚(yú)Y染色體特有的DNA標(biāo)記。

3.一種鑒定斑石鯛雌雄遺傳性別的方法，其特征在于，

（1）PCR擴(kuò)增：取待測(cè)斑石鯛，提取基因組DNA；以所得基因組DNA為模板，采用斑石鯛遺傳性別特異性引物對(duì)，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并將所得PCR擴(kuò)增產(chǎn)物與權(quán)利要求1所述的斑石鯛雌雄遺傳性別的特異性標(biāo)記進(jìn)行對(duì)比；

（2）結(jié)果判斷：從待測(cè)斑石鯛的基因組DNA中擴(kuò)增出635bp和925bp兩個(gè)DNA片段，即為判斷該待測(cè)斑石鯛為斑石鯛遺傳雄性個(gè)體X₁X₂Y；

或，待測(cè)斑石鯛的基因組DNA中僅擴(kuò)增出635bp的單一DNA片段，即為判斷該待測(cè)斑石鯛為斑石鯛遺傳雌性X₁X₁X₂X₂。

4.按權(quán)利要求3所述的鑒定斑石鯛雌雄遺傳性別的方法，其特征在于，所述斑石鯛遺傳性別特異性引物對(duì)為：

ChXY_F:1 : 5’-AAACAGAGGACATTCAAGCCG-3’；

ChXY_R:2 : 5’-GTTGCTGCCCTTCTTGCGT-3’。

5.一種檢測(cè)權(quán)利要求1所述的斑石鯛雌雄遺傳性別的特異性標(biāo)記的遺傳性別特異性引物，其特征在于，

ChXY_F:1 : 5’-AAACAGAGGACATTCAAGCCG-3’；

ChXY_R:2 : 5’-GTTGCTGCCCTTCTTGCGT-3’。

6.一種鑒定斑石鯛雌雄遺傳性別的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒含權(quán)利要求5所述的遺傳性別特異性引物。