[發(fā)明專利]一種胺脫氫酶突變體及其在手性胺醇化合物合成中的應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210082158.2
• 申請(qǐng)日: 2022-01-24
• 公開（公告）號(hào): CN116515782A
• 公開（公告）日: 2023-08-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫周通;曲戈;明輝
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院天津工業(yè)生物技術(shù)研究所
• 主分類號(hào): C12N9/06
• 分類號(hào): C12N9/06;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/00;C12P41/00;C12R1/19
• 代理公司: 北京知文通達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 16051
• 代理人: 歐陽(yáng)石文

1.一種突變胺脫氫酶，在SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第43、68、114、134、146、187、261、291、294位存在替換突變；優(yōu)選地，存在如下九種的任一種、任兩種、任三種、任四種、任五種、任六種、任七種、任八種或全部突變：

X1、第43位的蘇氨酸殘基突變?yōu)榧琢虬彼釟埢?/p>

X2、第68位的賴氨酸殘基突變?yōu)榻z氨酸殘基；

X3、第114位的谷氨酸殘基突變?yōu)槔i氨酸殘基、半胱氨酸殘基或亮氨酸殘基；

X4、第134位的蘇氨酸殘基突變?yōu)楦拾彼釟埢虬腚装彼釟埢?/p>

X5、第146位的脯氨酸殘基突變?yōu)槔i氨酸殘基；

X6、第187位的組氨酸殘基突變?yōu)樘於彼釟埢?/p>

X7、第261位的天冬氨酸殘基突變?yōu)榱涟彼釟埢?/p>

X8、第291位的纈氨酸殘基突變?yōu)榘腚装彼釟埢?/p>

X9、第294位的纈氨酸殘基突變?yōu)榘腚装彼釟埢虍惲涟彼釟埢?/p>

更優(yōu)選地，所述突變胺脫氫酶為：

GsAmDH-T43M，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第43位突變?yōu)榧琢虬彼幔?/p>

GsAmDH-E114V，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第114位突變?yōu)槔i氨酸；

GsAmDH-E114L，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第114位突變?yōu)榱涟彼幔?/p>

GsAmDH-E114C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第114位突變?yōu)榘腚装彼幔?/p>

GsAmDH-T134C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第134位突變?yōu)榘腚装彼幔?/p>

GsAmDH-T134G，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第134位突變?yōu)楦拾彼幔?/p>

GsAmDH-P146V，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第146位突變?yōu)槔i氨酸；

GsAmDH-H187D，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第187位突變?yōu)樘於彼幔?/p>

GsAmDH-V291C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第291位突變?yōu)榘腚装彼幔?/p>

GsAmDH-V294C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第294位突變?yōu)榘腚装彼幔?/p>

GsAmDH-V294I，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第294位突變?yōu)楫惲涟彼幔?/p>

GsAmDH-T43M/E114V，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第43、114位分別突變?yōu)榧琢虬彼岷屠i氨酸；

GsAmDH-T43M/T134C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第43、134位分別突變?yōu)榧琢虬彼岷桶腚装彼幔?/p>

GsAmDH-T43M/P146V，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第43、146位分別突變?yōu)榧琢虬彼岷屠i氨酸；

GsAmDH-T43M/H187D，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第43、187位分別突變?yōu)榧琢虬彼岷吞於彼幔?/p>

GsAmDH-T43M/V291C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第43、291位分別突變?yōu)榧琢虬彼岷桶腚装彼幔?/p>

GsAmDH-T43M/V294C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第43、294位分別突變?yōu)榧琢虬彼岷桶腚装彼幔?/p>

GsAmDH-E114V/T134C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第114、134位分別突變?yōu)槔i氨酸和半胱氨酸；

GsAmDH-E114V/P146V，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第114、146位均突變?yōu)槔i氨酸；

GsAmDH-E114V/H187D，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第114、187位分別突變?yōu)槔i氨酸和天冬氨酸；

GsAmDH-E114V/V291C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第114、291位分別突變?yōu)槔i氨酸和半胱氨酸；

GsAmDH-E114V/V294C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第114、294位分別突變?yōu)槔i氨酸和半胱氨酸；

GsAmDH-T134C/P146V，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第134、146位分別突變?yōu)榘腚装彼岷屠i氨酸；

GsAmDH-T134C/H187D，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第134、187位分別突變?yōu)榘腚装彼岷吞於彼幔?/p>

GsAmDH-T134C/V291C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第134、291位均突變?yōu)榘腚装彼幔?/p>

GsAmDH-T134C/V294C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第134、294位均突變?yōu)榘腚装彼幔?/p>

GsAmDH-P146V/H187D，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第146、187位分別突變?yōu)槔i氨酸和天冬氨酸；

GsAmDH-P146V/V291C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第146、291位分別突變?yōu)槔i氨酸和半胱氨酸；

GsAmDH-P146V/V294C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第146、294位分別突變?yōu)槔i氨酸和半胱氨酸；

GsAmDH-H187D/V291C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第187、291位分別突變?yōu)樘於彼岷桶腚装彼幔?/p>

GsAmDH-H187D/V294C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第187、294位分別突變?yōu)樘於彼岷桶腚装彼幔?/p>

GsAmDH-V291C/V294C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第291、294位均突變?yōu)榘腚装彼幔?/p>

GsAmDH-E114V/T134C/P146V，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第114、134、146位分別突變?yōu)槔i氨酸、半胱氨酸和纈氨酸；

GsAmDH-E114V/T134C/H187D，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第114、134、187位分別突變?yōu)槔i氨酸、半胱氨酸和天冬氨酸；

GsAmDH-E114V/T134C/V294C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第114、134、294位分別突變?yōu)槔i氨酸、半胱氨酸和半胱氨酸；

GsAmDH-E114V/P146V/H187D，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第114、146、187位分別突變?yōu)槔i氨酸、纈氨酸和天冬氨酸；

GsAmDH-E114V/P146V/V294C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第114、146、294位分別突變?yōu)槔i氨酸、纈氨酸和半胱氨酸；

GsAmDH-E114V/H187D/V294C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第114、187、294位分別突變?yōu)槔i氨酸、天冬氨酸和半胱氨酸；

GsAmDH-T134C/P146V/H187D，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第134、146、187位分別突變?yōu)榘腚装彼帷⒗i氨酸和天冬氨酸；

GsAmDH-T134C/P146V/V294C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第134、146、294位分別突變?yōu)榘腚装彼帷⒗i氨酸和半胱氨酸；

GsAmDH-T134C/H187D/V294C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第134、187、294位分別突變?yōu)榘腚装彼帷⑻於彼岷桶腚装彼幔?/p>

GsAmDH-P146V/H187D/V294C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第146、187、294位分別突變?yōu)槔i氨酸、天冬氨酸和半胱氨酸；

GsAmDH-E114V/T134C/P146V/H187D，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第114、134、146、187位分別突變?yōu)槔i氨酸、半胱氨酸、纈氨酸和和天冬氨酸；

GsAmDH-E114V/T134C/P146V/V294C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第114、134、146、294位分別突變?yōu)槔i氨酸、半胱氨酸、纈氨酸和和半胱氨酸；

GsAmDH-E114V/T134C/H187D/V294C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第114、134、187、294位分別突變?yōu)槔i氨酸、半胱氨酸、天冬氨酸和和半胱氨酸；

GsAmDH-E114V/P146V/H187D/V294C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第114、146、187、294位分別突變?yōu)槔i氨酸、纈氨酸、天冬氨酸和和半胱氨酸；

GsAmDH-T134C/P146V/H187D/V294C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第134、146、187、294位分別突變?yōu)榘腚装彼帷⒗i氨酸、天冬氨酸和和半胱氨酸；

GsAmDH-E114V/T134C/P146V/H187D/V294C，即SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的第114、134、146、187、294位分別突變?yōu)槔i氨酸、半胱氨酸、纈氨酸、天冬氨酸和和半胱氨酸。