[發明專利]一種發酵生產尼莫克汀的方法

在審

• 申請號: 202210080434.1
• 申請日: 2022-01-24
• 公開（公告）號: CN114525315A
• 公開（公告）日: 2022-05-24
• 發明（設計）人: 劉聰潔;王雪峰
• 申請（專利權）人: 河北圣雪大成制藥有限責任公司
• 主分類號: C12P17/18
• 分類號: C12P17/18;C12N1/20;C12R1/465
• 代理公司: 石家莊君聯專利代理事務所(特殊普通合伙) 13125
• 代理人: 張柳云

1.一種發酵生產尼莫克汀的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

(1)斜面培養：將保存的尼莫克汀生產菌株接種于斜面培養基上，25-30℃，20％-60％濕度條件下培養6-9天，得到成熟的斜面孢子；

(2)種子培養：將步驟(1)中得到的成熟的斜面孢子接種到種子培養基，25-30℃，20％-60％濕度條件，200-240rpm，培養24-36h，得到成熟的種子液；

(3)發酵培養：將步驟(2)中得到的成熟的種子液按照5-10％接種量接種至發酵培養基，25-30℃，20％-60％濕度條件，200-240rpm，培養6-12天，得到含有尼莫克汀的發酵液。

2.根據權利要求1所述的一種發酵生產尼莫克汀的方法，其特征在于，所述的斜面培養基的各成分的重量百分比為：葡萄糖0.1-0.4％，麥芽糖0.05-0.2％，酵母粉0.2-0.5％，玉米淀粉0.3-0.6％，低溫豆粉0.3-0.6％，硝酸鉀0.05-0.2％，磷酸氫二鉀0.05-0.1％，氯化鈉0.05-0.1％，硫酸鎂0.01-0.03％，硫酸亞鐵0.01-0.03％，碳酸鈣0.01-0.03％，瓊脂1.8-2.2％，使用純化水配制，用20％的NaOH調節pH至6.8-7.0。

3.根據權利要求2所述的一種發酵生產尼莫克汀的方法，其特征在于，所述的斜面培養基的各成分的重量百分比為：葡萄糖0.3％，麥芽糖0.1％，酵母粉0.4％，玉米淀粉0.5％，低溫豆粉0.5％，硝酸鉀0.1％，磷酸氫二鉀0.05％，氯化鈉0.05％，硫酸鎂0.03％，硫酸亞鐵0.01％，碳酸鈣0.01％，瓊脂2.0％。使用純化水配制，用20％的NaOH調節pH至6.8-7.0。

4.根據權利要求1所述的一種發酵生產尼莫克汀的方法，其特征在于，所述的種子培養基的各成分的重量百分比為：葡萄糖0.5-1.5％，玉米糊精0.5-1.5％，玉米淀粉0.5-2.0％，高溫豆粉1.0-2.0％，棉籽餅粉0.3-1.0％，酵母粉0.5-1.0％，氯化鈉0.05-0.1％，硫酸鎂0.05-0.1％，磷酸氫二鉀0.05-0.2％，玉米油為體積百分比的0.3-1.0％，使用自來水配制，用20％的NaOH調節pH至7.0-7.2。

5.根據權利要求4所述的一種發酵生產尼莫克汀的方法，其特征在于，所述的種子培養基的各成分的重量百分比為：葡萄糖1.0％，玉米糊精1.0％，玉米淀粉1.0％，高溫豆粉1.5％，棉籽餅粉0.6％，酵母粉1.0％，氯化鈉0.05％，硫酸鎂0.1％，磷酸氫二鉀0.1％，玉米油為體積百分比的0.5％，使用自來水配制，用20％的NaOH調節pH至7.0-7.2。

6.根據權利要求1所述的一種發酵生產尼莫克汀的方法，其特征在于，所述的發酵培養基的各成分的重量百分比為：葡萄糖1.0-2.0％，乳糖1.0-3.0％，玉米淀粉4.0-6.0％，高溫豆粉1.0-2.5％，棉籽餅粉0.5-1.5％，硝酸鉀0.05-0.2％，硫酸鎂0.05-0.2％，硫酸鋅0.001-0.003％，硫酸錳0.001-0.003％，鉬酸鈉0.001-0.003％，碳酸鈣0.4-1.0％，α-淀粉酶為玉米淀粉重量的0.05-0.1％，表面活性劑0.05-0.5％，玉米油為體積百分比的1.0-6.0％，使用自來水配制，用20％的NaOH調節pH至7.0-7.2。

7.根據權利要求6所述的一種發酵生產尼莫克汀的方法，其特征在于，所述的發酵培養基的成分及其含量為：葡萄糖1.0％，乳糖2.0％，玉米淀粉5.0％，高溫豆粉1.2％，棉籽餅粉0.6％，硝酸鉀0.1％，硫酸鎂0.1％，硫酸鋅0.001％，硫酸錳0.001％，鉬酸鈉0.002％，碳酸鈣0.4％，α-淀粉酶為玉米淀粉重量的0.05％，鼠李糖脂0.1％，玉米油為體積百分比的4.0％，使用自來水配制，用20％的NaOH調節pH至7.0-7.2。