[發(fā)明專利]綜合抗逆埋棲型雙殼貝類的篩選方法

有效

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• 申請日: 2022-01-24
• 公開（公告）號: CN114391494B
• 公開（公告）日: 2023-09-12
• 發(fā)明（設計）人: 呂為群;李杰;李曉雪;楊昆;師夢夢
• 申請（專利權）人: 上海海洋大學
• 主分類號: A01K61/54
• 分類號: A01K61/54;A01K61/90
• 代理公司: 上海伯瑞杰知識產權代理有限公司 31227
• 代理人: 范艷靜

1.一種綜合抗逆埋棲型雙殼貝類的篩選方法，其特征在于：包括如下步驟：

(1)養(yǎng)殖前對養(yǎng)殖系統(tǒng)進行消毒，然后注入海水并不斷曝氣，在養(yǎng)殖系統(tǒng)的循環(huán)水系統(tǒng)中投加酵母膏粉和硝化細菌，保證循環(huán)水系統(tǒng)運轉2周以上；

(2)監(jiān)測養(yǎng)殖系統(tǒng)水質，直至達到養(yǎng)殖標準的環(huán)境指標；

(3)將埋棲型雙殼貝類提前曝氣并沖洗，再放入提前曝氣的海水中浸泡，然后放入步驟(2)中達標的循環(huán)水系統(tǒng)中；

(4)在同齡埋棲型雙殼貝類中，挑選出個體肥大、殼表新鮮的健康個體，按體重從大到小排列，選取前1/3的雙殼貝類放入養(yǎng)殖系統(tǒng)中暫養(yǎng)；

(5)將步驟(4)篩選出的埋棲型雙殼貝類，依次利用急性應激后開殼恢復行為、攝食行為、埋沙行為和呼吸代謝，將主動型的健康埋棲型雙殼貝類篩出；

(6)在步驟(5)得到的主動型的健康埋棲型雙殼貝類中，選擇呼吸代謝率低的作為篩選出的抗逆性強的貝類個體用作繁殖用親貝，至此篩選結束；

步驟(5)中，所述急性應激后開殼恢復行為的篩選方法為：對埋棲型雙殼貝類停止喂食一天后，取出置于空氣暴露后，放入裝有海水的玻璃缸中；利用攝像監(jiān)測系統(tǒng)，對埋棲型雙殼貝類進行水平拍攝，記錄其開殼時間；將開殼時間數值從短到長排列，選取前1/2的埋棲型雙殼貝類進行后續(xù)篩選，篩選完畢讓其恢復若干小時；

所述攝食行為的篩選方法為：對攝食實驗采用靜水系統(tǒng)測定：實驗開始前將埋棲型雙殼貝類置于空氣暴露后，分別放入裝有等量小球藻的攝食瓶中，實驗開始后每隔20min取水樣測量小球藻濃度，并計算出雙殼貝類的攝食率；將攝食率數值從小到大排列，選取后1/2的埋棲型雙殼貝類進行后續(xù)篩選，篩選完畢讓其恢復若干小時；

所述埋沙行為的篩選方法為：將埋棲型雙殼貝類取出置于空氣暴露后，放入裝有海水和細沙的玻璃缸中，保證沙子潔凈且鋪平；建立攝像監(jiān)測系統(tǒng)，將埋棲型雙殼貝類垂直水面放置，開口方向朝下，記錄雙殼貝類完全埋入沙中的時間；將埋沙時間數值從短到長排列，選取前1/2的埋棲型雙殼貝類進行后續(xù)篩選，篩選完畢讓其恢復若干小時；

所述呼吸代謝的篩選方法為：利用自動間歇流動呼吸測量儀測量埋棲型雙殼貝類的呼吸代謝率，實驗開始前對呼吸測量儀進行消毒清洗，完畢后將埋棲型雙殼貝類放入呼吸室內，啟動程序后記錄雙殼貝類的呼吸代謝率，將呼吸代謝率數值從小到大排列，選取呼吸代謝率前1/2的埋棲型雙殼貝類個體；

所述抗逆性強是指受到空氣暴露應激后，埋棲型雙殼貝類有強的生理恢復能力、高存活率和食欲、以及低呼吸代謝率；

所述埋棲型雙殼貝類為文蛤。

2.根據權利要求1所述的綜合抗逆埋棲型雙殼貝類的篩選方法，其特征在于：步驟(2)中，所述環(huán)境指標為：養(yǎng)殖系統(tǒng)內水溫為18-25℃，光照時間和黑暗時間分別為12h，光照強度為35-45lx，pH值為7.5-8.5之間；溶氧濃度≥6.8mg/L，氨氮濃度≤0.1mg/L，亞硝氮濃度≤0.1mg/L，硫化物濃度≤0.1mg/L。

3.根據權利要求1所述的綜合抗逆埋棲型雙殼貝類的篩選方法，其特征在于：步驟(3)中，所述對埋棲型雙殼貝類的沖洗次數為3次以上，浸泡的曝氣海水的溶氧濃度≥6.8mg/L。