[發明專利]一種免酶解程序制備林蛙卵膠肽的方法

在審

• 申請號: 202210075661.5
• 申請日: 2022-01-22
• 公開（公告）號: CN114365851A
• 公開（公告）日: 2022-04-19
• 發明（設計）人: 房永清;劉志文
• 申請（專利權）人: 吉林省蛙王生物工程有限公司
• 主分類號: A23L33/18
• 分類號: A23L33/18;A23L2/39;A23L2/66;A01K67/02
• 代理公司: 長春市恒譽專利代理事務所(普通合伙) 22212
• 代理人: 梁紫鉞

本發明提供一種免酶解程序制備林蛙卵膠肽的方法，包括產卵蛙選擇、產卵前預處理、產卵準備、受精卵處理、卵膠肽制備和冰凍干燥制備卵膠肽等步驟。本發明根據林蛙胚胎發育學原理，結合中國林蛙優良品種選育，采用商品林蛙繁殖期自然抱對產卵，利用林蛙胚胎自身的蛋白酶系在胚胎發育過程中的自我調節、分解機制，將林蛙胚胎中的卵膠蛋白分解為以多肽、寡肽為主，降低生產成本，解決了人工酶解產品異味、高成本、操作程序繁雜的難題，采用了“養蛙取卵”的方法，使成齡雌蛙可持續利用，生產原生態產品，改變了“殺蛙取油”的傳統方法，保護了生態平衡的同時，增產增收，促進靜置可持續性發展。

技術領域

本發明涉及一種林蛙(雪蛤)卵膠肽的制備方法，特別涉及一種免酶解程序制備林蛙卵膠肽的方法。

背景技術

林蛙，目前通指“東北林蛙(學名：Rana dybowskii)”是蛙科、林蛙屬無尾兩棲動物。主產中國東北山區，包括長白山脈、小興安嶺大部、張廣才嶺腹地，亦被稱為雪蛤、哈什螞(哈士蟆)，是集藥用、食補、美容功能于一體的珍稀物種，其產品有延緩衰老、增強免疫力的作用，因此，林蛙養殖業已經成為我國東北山區發展的重要產業。產業發展的同時，為獲得林蛙油產品，每年捕殺數億只林蛙以獲取林蛙油(輸卵管)，但丟棄了營養豐富的卵細胞等副產物，造成大量資源浪費的同時也對生態環境和種質資源保護帶來巨大威脅。

為充分開發利用林蛙資源，人們開始對林蛙進行了全方位的研究工作。對肽在生命體中的作用機理的深入研究發現，肽類物質是由多個氨基酸分子聚合成的小分子物質，將蛋白質分解成低分子量的肽類物質，比蛋白質更易被人體消化和吸收，而且還含有特殊功能的多肽，因此，研究出許多有關制備林蛙油、肉、皮等肽的生產方法，例如利用林蛙油制備林蛙油肽的方法，取新鮮林蛙油或林蛙油干品加入蛋白酶經過酶解處理制備林蛙油肽。

現有的文獻資料所公開的林蛙油肽制備方法比較多，林蛙卵膠肽的相關資料未見報道，并且現有的肽的制備過程存在許多問題：都是采用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶等蛋白酶酶解蛋白質的方法獲取肽產品，但利用蛋白酶酶解蛋白質后產品會產生異味，影響口感；同時隨著水解程度的加深，林蛙油肽中具有活性成分的游離雌二醇的含量逐漸增加，導致林蛙油肽雌激素含量升高，不利于大多數人食用，因此限制了林蛙油的食用人群和推廣范圍；酶解后還需要進行滅酶處理，因此制備過程程序繁雜、生產成本高；需要捕殺林蛙以獲取林蛙油原料，可持續性差，不利于產業發展和資源保護。綜上原因，需要提供一種能夠可持續利用林蛙資源、減少資源浪費、不需要添加蛋白酶的低成本、男女老少皆宜的林蛙肽的制備方法，促進林蛙資源的健康發展。

發明內容

為了解決上述技術問題，本發明提供一種免酶解程序制備林蛙卵膠肽的方法，包括以下步驟：

(1)產卵蛙選擇：

在我國東部山區，每年4-5月份，待林蛙出蟄后，依照留種標準統一進行優良品種選擇，優良品種留作繁殖，篩選出不合格的雌雄林蛙用于生產卵膠肽；

(2)產卵前預處理：

將篩選出的用于生產卵膠肽的林蛙雌雄分離、沖洗，分別進入相鄰的預溫池內預溫，預溫池內水溫18℃～22℃，自然光照，蛙的密度小于500只/㎡；

(3)產卵準備：

預處理2～3天后，受蛙鳴和溫度的影響，待雌蛙進入跌卵期，將雌、雄蛙分別從預溫池中撈出、沖洗，按雌雄數量1:1.2～1.5的比例混合放入產卵池中，產卵池水溫18℃～22℃，自然光照，蛙的密度小于40只/㎡；

(4)受精卵前處理：

卵產出15～30分鐘后(充分受精)用網兜撈出，用純凈水或礦泉水清洗卵團表面后，進入環境溫度22℃～24℃、相對濕度70％～85％的卵發育室內，置于發育板上，單層擺放，暴露在空氣中，適時對卵團噴霧補水，保持卵團表面濕潤，補光照度3000-4000勒克斯，使受精卵正常發育；

(5)卵膠肽制備：