[發明專利]新型冠狀病毒多種變異株核酸質譜檢測的引物組合、試劑盒及檢測方法在審
| 申請號： | 202210074264.6 | 申請日： | 2022-01-21 |
| 公開（公告）號： | CN114686620A | 公開（公告）日： | 2022-07-01 |
| 發明（設計）人： | 翟志向;周曉光;宋合興;李晨;李運濤 | 申請（專利權）人： | 生物島實驗室;廣東默迪優譜生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京智信四方知識產權代理有限公司 11519 | 代理人： | 葛啟宏 |
| 地址： | 510320 廣東省廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 新型 冠狀病毒 多種 變異 核酸 檢測 引物 組合 試劑盒 方法 | ||
1.一種用于新型冠狀病毒多種變異株核酸質譜檢測的引物組合，其特征在于，包括16條擴增引物和9條質量探針延伸引物，其中，擴增引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1-16所示；質量探針延伸引物的核苷酸序列如SEQ ID No.17-25所示。
2.權利要求1所述的引物組合在制備新型冠狀病毒多種變異株核酸質譜檢測產品中的應用。
3.一種新型冠狀病毒多種變異株核酸質譜檢測試劑盒，其特征在于，包括權利要求1所述的引物組合。
4.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，還包括RT-PCR反應試劑、去磷酸化反應試劑及質量探針延伸反應試劑。
5.一種新型冠狀病毒多種變異株核酸質譜檢測方法，其特征在于，所述方法使用如權利要求3或4所述的試劑盒，包括：
(1)利用16條擴增引物對待測樣本進行RT-PCR擴增反應；
(2)對步驟(1)得到的擴增產物利用堿性磷酸酶進行去磷酸化處理；
(3)利用9條質量探針延伸引物對步驟(2)得到去磷酸化產物進行單堿基延伸；
(4)對步驟(3)得到的延伸產物進行樹脂脫鹽純化；
(5)質譜檢測，確定變異株分型。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述新型冠狀病毒多種變異株為Alpha變異株、Beta變異株、Delta變異株或Lambda變異株。
7.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述質譜檢測采用的是基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜MALDI-TOF MS。
8.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述堿性磷酸酶為蝦堿性磷酸酶。
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