[發(fā)明專利]多種呼吸道病毒核酸質(zhì)譜檢測的引物組合、試劑盒及檢測方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202210074260.8 | 申請日： | 2022-01-21 |
| 公開（公告）號： | CN114350857A | 公開（公告）日： | 2022-04-15 |
| 發(fā)明（設計）人： | 翟志向;周曉光;宋合興;李運濤 | 申請（專利權(quán)）人： | 生物島實驗室;廣東默迪優(yōu)譜生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京智信四方知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11519 | 代理人： | 葛啟宏 |
| 地址： | 510320 廣東省廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 多種 呼吸道 病毒 核酸 檢測 引物 組合 試劑盒 方法 | ||
1.一種用于多種呼吸道病毒核酸質(zhì)譜檢測的引物組合，其特征在于，包括48條擴增引物和24條質(zhì)量探針延伸引物，其中，擴增引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1-48所示；質(zhì)量探針延伸引物的核苷酸序列如SEQ ID No.49-72所示。
2.權(quán)利要求1所述的引物組合在制備多種呼吸道病毒核酸質(zhì)譜檢測產(chǎn)品中的應用。
3.一種用于多種呼吸道病毒核酸質(zhì)譜檢測的試劑盒，其特征在于，包括權(quán)利要求1所述的引物組合。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，還包括RT-PCR反應試劑、去磷酸化反應試劑及質(zhì)量探針延伸反應試劑。
5.一種檢測多種呼吸道病毒的方法，其特征在于，所述方法使用如權(quán)利要求3或4所述的試劑盒，包括：
(1)利用48條擴增引物對待測樣本進行RT-PCR擴增反應；
(2)對步驟(1)得到的擴增產(chǎn)物利用堿性磷酸酶進行去磷酸化處理；
(3)利用24條質(zhì)量探針延伸引物對步驟(2)得到去磷酸化產(chǎn)物進行單堿基延伸；
(4)對步驟(3)得到的延伸產(chǎn)物進行樹脂脫鹽純化；
(5)質(zhì)譜檢測，確定病原體種類。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述多種呼吸道病毒為呼吸道合胞病毒A和B、副流感病毒1型至4型、人偏肺病毒A和B、人博卡病毒1型和2型、鼻病毒、甲流病毒通用型、甲流病毒H1N1、甲流病毒H3N2、甲流病毒H1N12009、乙流病毒、冠狀病毒-SARS、冠狀病毒-MERS、新型冠狀病毒SARS-CoV-2和腺病毒。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述質(zhì)譜檢測采用的是基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜MALDI-TOF MS。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述堿性磷酸酶為蝦堿性磷酸酶。
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