[發明專利]一種用于提高卷枝毛霉WJ11產γ-亞麻酸產量的方法

在審

• 申請號: 202210073727.7
• 申請日: 2022-01-21
• 公開（公告）號: CN114410482A
• 公開（公告）日: 2022-04-29
• 發明（設計）人: 張懷淵;周長春;宋元達;房華;黃敬尊;張旭;左權
• 申請（專利權）人: 山東和眾康源生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N3/00;C12P7/6427;C12R1/785
• 代理公司: 淄博川誠知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 37275
• 代理人: 劉子成

本發明公開了一種用于提高卷枝毛霉WJ11產γ?亞麻酸產量的方法，包括以下步驟：步驟1、菌種分離篩選，選用的菌種為卷枝毛霉WJ11；步驟2、制備PDA斜面培養基；步驟3、制備搖瓶基；步驟4、制備液體培養基；步驟5、固體原料發酵；步驟6、孢子分離；本發明依次進行菌種分離篩選，選用的菌種為卷枝毛霉WJ11；制備PDA斜面培養基；制備搖瓶基；制備液體培養基；固體原料發酵；孢子分離；本發明使用卷枝毛霉WJ11菌體，并采用固體原料發酵方式，與液態發酵相比，油脂含量偏低，而亞麻酸的比例更高，液態發酵亞麻酸比例只有12?14％，而固態發酵孢子的亞麻酸比例能達到20％以上，提高了亞麻酸的產量。

技術領域

本發明涉及微生物技術領域，具體為一種用于提高卷枝毛霉WJ11產γ-亞麻酸產量的方法。

背景技術

亞麻酸是人體不能缺少、自身又不能合成的必需脂肪酸，屬于維生素F樣物質；人體一旦缺乏，其免疫、心腦血管、生殖內分泌等系統就會出現異常；γ-亞麻酸在人體可轉化成前列腺素E1，能抑制血小板的聚集和血栓素A2的形成，有明顯的抗血栓及抗動脈粥樣斑塊形成的作用，能顯著降低高血脂、膽固醇和血糖，降低密度脂蛋白等，延緩衰老和女性經前癥狀也有顯著療效；另一方面，γ-亞麻酸外用是優秀的調理劑和營養補充劑，能增進血液流通和細胞的新陳代謝。

亞麻酸人體不能自身合成，現有技術通常是采用微生物培養的方式制備亞麻酸，現有的亞麻酸產量交底，因此，提出了一種能夠提高亞麻酸產量的制備工藝。

發明內容

本發明的目的在于提供一種用于提高卷枝毛霉WJ11產γ-亞麻酸產量的方法，以解決上述背景技術中提出的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：一種用于提高卷枝毛霉WJ11產γ-亞麻酸產量的方法，包括以下步驟：

步驟1、菌種分離篩選

選用的菌種為卷枝毛霉WJ11；

步驟2、制備PDA斜面培養基；

步驟3、制備搖瓶基

將麩皮加水1000ml煮沸10分鐘，然后過濾，再定容1000ml，接著加入葡萄糖、酒石酸銨、酵母粉、氯化鈣、硫酸鎂和磷酸二氫鉀；將做好的PDA斜面培養基接種到搖瓶中；

步驟4、制備液體培養基

將麥芽糊精、蛋白胨、葡萄糖、麩皮、消泡劑和水均勻混合，然后在121℃條件下滅菌處理40分鐘；然后冷卻至35℃，并接入到搖瓶基中，接種量為1.2L/1000L；然后在29℃-31℃條件下，培養24小時；

步驟5、固體原料發酵

將麩皮、葡萄糖、硫酸銨和酵母膏混合均勻，然后在121℃條件下，蒸煮50分鐘；然后冷卻至35℃，然后和卷枝毛霉WJ11接種到液體培養基中，接種時流速要慢，并且滅菌罐須旋轉，菌種拌勻后，料的初始水含量約在55％-60％；然后進行裝盤，裝盤厚度為3cm，裝盤完成后室溫調節30℃，進行培養，室溫升高超過35℃時并有失水時開始通過噴淋無菌涼水降溫及補水；噴淋涼水時，每次噴淋時間不能過長，持續培養120小時；

步驟6、孢子分離

采用風分離裝置進行物理分離，得到發酵孢子，并全部通過100目篩過濾。

其中，所述PDA斜面培養基按重量份包括以下組份：去皮土豆200g、葡萄糖20g、瓊脂20g、水1000mL。

其中，所述PDA斜面培養基的制備方法包括以下步驟：

(1)、稱量和熬煮

按重量份分別稱取去皮土豆、葡萄糖和瓊脂，將去皮土豆切成小塊放入鍋中，加水1000ml，在加熱器上加熱至沸騰，維持20-30min，然后用2層紗布趁熱在量杯上過濾，濾渣棄取，再濾液補充水分到1000ml；