[發明專利]一種促乳酸菌生長發酵的肽-鋅配合物的制備方法及應用

在審

• 申請號: 202210073539.4
• 申請日: 2022-01-21
• 公開（公告）號: CN114395602A
• 公開（公告）日: 2022-04-26
• 發明（設計）人: 曾慶祝;謝翠娜
• 申請（專利權）人: 廣州大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/34;C12N1/20;C12N1/38;C12R1/225
• 代理公司: 廣州高炬知識產權代理有限公司 44376
• 代理人: 孫明科

1.一種促乳酸菌生長發酵的肽-鋅配合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1、水解：將大豆分離蛋白使用蛋白酶進行水解，得到水解后的蛋白；

步驟2、超濾：將水解后的蛋白進行超濾分離處理，得到小分子大豆肽；

步驟3、純化：將小分子大豆肽采用大孔吸附樹脂進行吸附和洗脫，得到疏水性的肽；

步驟4、反應：將疏水性的肽與硫酸鋅溶液在進行反應，得到疏水肽-鋅配合物。

2.根據權利要求1所述的一種促乳酸菌生長發酵的肽-鋅配合物的制備方法，其特征在于，所述步驟1中，水解過程是先將大豆分離蛋白與蒸餾水混合，再加入蛋白酶進行酶解，之后經過沸水浴與離心處理，得到澄清的多肽溶液。

3.根據權利要求1所述的一種促乳酸菌生長發酵的肽-鋅配合物的制備方法，其特征在于，所述水解的反應溫度為55℃，pH為8.0，酶解時間為3h。

4.根據權利要求2所述的一種促乳酸菌生長與發酵的肽-鋅配合物的制備方法，其特征在于，所述大豆分離蛋白與所述蒸餾水的混合質量比為1：10；所述蛋白酶的加入量為所述大豆分離蛋白質量的2％。

5.根據權利要求2所述的一種促乳酸菌生長發酵的肽-鋅配合物的制備方法，其特征在于，所述沸水浴的時間為10min，離心處理的轉速為8000rpm，離心處理的時間為10min。

6.根據權利要求1所述的一種促乳酸菌生長與發酵的肽-鋅配合物的制備方法，其特征在于，所述步驟2中，超濾是采用5000Da的超濾膜進行超濾；超濾結束后進行冷凍干燥。

7.根據權利要求1所述的一種促乳酸菌生長發酵的肽-鋅配合物的制備方法，其特征在于，所述步驟3中，先將小分子大豆肽按照10mg/mL的濃度使用蒸餾水進行溶解，之后再采用大孔吸附樹脂進行吸附；然后分別使用質量分數為25％、50％以及75％的乙醇水溶液進行洗脫分離，得到三種不同疏水性的多肽組分。

8.根據權利要求1所述的一種促乳酸菌生長發酵的肽-鋅配合物的制備方法，其特征在于，所述步驟4中，使用硫酸鋅溶液與疏水性的肽按照鋅肽的質量比1：6混合反應，反應溫度為60℃、pH為5.5、時間為40min。

9.一種促乳酸菌生長發酵的肽-鋅配合物的應用，其特征在于，所述應用是使用權利要求1～7任意之一所述的制備方法制備得到的肽-鋅配合物用于乳酸菌的培養。

10.根據權利要求8所述的一種促乳酸菌生長發酵的肽-鋅配合物的應用，其特征在于，所述乳酸菌為嗜熱鏈球菌或德氏乳桿菌保加利亞亞種。