[發明專利]用于檢測腫瘤微小核酸標志物的表面增強拉曼散射檢測試劑盒及其制備方法與應用在審
| 申請號： | 202210072000.7 | 申請日： | 2022-01-21 |
| 公開（公告）號： | CN114410786A | 公開（公告）日： | 2022-04-29 |
| 發明（設計）人： | 宋春元;汪聯輝;張晶晶 | 申請（專利權）人： | 南京郵電大學 |
| 主分類號： | C12Q1/6886 | 分類號： | C12Q1/6886;C12Q1/6837;C12Q1/6806;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京經緯專利商標代理有限公司 32200 | 代理人： | 曹翠珍 |
| 地址： | 210009 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 檢測 腫瘤 微小 核酸 標志 表面 增強 散射 試劑盒 及其 制備 方法 應用 | ||
1.用于非疾病診斷目的的腫瘤微小核酸標志物檢測的表面增強拉曼散射檢測試劑盒，其特征在于，所述SERS檢測試劑盒包含SERS檢測芯片、第一試劑和第二試劑；
所述SERS檢測芯片為表面修飾有發夾型DNA單鏈H1的銀納米棒陣列基片；
所述第一試劑為發夾型DNA單鏈H2，所述第二試劑為配合基片使用的SERS探針；
所述SERS探針為表面修飾探針單鏈P和拉曼分子5,5'-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)(DTNB)的金納米顆粒。
2.根據權利要求1所述的用于非疾病診斷目的的腫瘤微小核酸標志物檢測的表面增強拉曼散射檢測試劑盒，其特征在于：
以檢測胃癌微小核酸標志物miRNA-378為例，
所述發夾型DNA單鏈H1堿基序列如SEQ ID NO：2所示：
H1：5’-SH-(CH2)6-TTT TTT TTT TTT TTT TTT TTT TTT TTT TCC TTC TGA CTC CAAGTC CAG TCA GAA GGA ACT AGC ACT GGA CTT GGA GT-3’
所述發夾型DNA單鏈H2的堿基序列如SEQ ID NO：3所示：
H2：5’-GTC CAG TGC TAG TTC CTT CTG ACT GGA CTT GGA CAC AGA AGG AAC TAG CCGACT CAA GAG CAC-3’
所述探針單鏈P的堿基序列如SEQ ID NO：4所示：
P：5’-SH-(CH2)6-TTT TTT TTT GTG CTC TTG AGT CG-3’。
3.根據權利要求2所述的用于非疾病診斷目的的腫瘤微小核酸標志物檢測的表面增強拉曼散射檢測試劑盒，其特征在于：
調整H1、H2和P的堿基序列為H1-199a、H2-199a和P-199a，所得試劑盒用于檢測胃癌微小核酸標志物miRNA-199a-3p；
調整H1、H2和P的堿基序列為H1-100、H2-100和P-100，所得試劑盒用于檢測胃癌微小核酸標志物miRNA-100。
4.根據權利要求1所述的用于非疾病診斷目的的腫瘤微小核酸標志物檢測的表面增強拉曼散射檢測試劑盒，其特征在于，所述銀納米棒陣列采用真空電子束蒸發鍍膜技術制備；所述金納米顆粒粒徑為15～100nm。
5.權利要求1所述的用于非疾病診斷目的的腫瘤微小核酸標志物檢測的表面增強拉曼散射檢測試劑盒，其特征在于，所述發夾型DNA單鏈H1的濃度為0.5～2μM，所述第一試劑的濃度為5～20μM。
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