[發明專利]一種巴氏生孢八疊球菌的培養方法在審
| 申請號： | 202210060736.2 | 申請日： | 2022-01-19 |
| 公開（公告）號： | CN114231468A | 公開（公告）日： | 2022-03-25 |
| 發明（設計）人： | 徐晶;王先志;姚武 | 申請（專利權）人： | 同濟大學 |
| 主分類號： | C12N1/20 | 分類號： | C12N1/20;C12R1/01 |
| 代理公司： | 上海科盛知識產權代理有限公司 31225 | 代理人： | 褚明偉 |
| 地址： | 200092 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 巴氏生孢八疊 球菌 培養 方法 | ||
1.一種巴氏生孢八疊球菌的培養方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)將巴氏生孢八疊球菌在固體活化培養基中進行活化，得到活化菌種；
(2)將步驟(1)得到的活化菌種接種至液體種子培養基中進行培養，從中選取單位脲酶活性高于5.0U/ml/OD600的菌液作為種子液；
(3)將步驟(2)的種子液接種至液體芽孢培養基中發酵培養，得到巴氏生孢八疊球菌。
2.根據權利要求1所述的一種巴氏生孢八疊球菌的培養方法，其特征在于，步驟(1)中，固體活化培養基配方如下：
以1L水計，大豆蛋白胨3-8g、酪蛋白12-16g、尿素17-22g、瓊脂15-20g，pH為8.5-9.5。
3.根據權利要求1所述的一種巴氏生孢八疊球菌的培養方法，其特征在于，步驟(1)中，活化過程具體為挑取低溫保存的巴氏生孢八疊球菌菌苔，通過平板劃線方式劃線后培養。
4.根據權利要求3所述的一種巴氏生孢八疊球菌的培養方法，其特征在于，培養過程中，培養溫度為室溫，培養時間為36-72h。
5.根據權利要求1所述的一種巴氏生孢八疊球菌的培養方法，其特征在于，步驟(2)中，液體種子培養基配方如下：
以1L水計，大豆蛋白胨3-8g、酪蛋白12-16g、尿素17-22g，pH為8.5-9.5。
6.根據權利要求1所述的一種巴氏生孢八疊球菌的培養方法，其特征在于，步驟(2)中，培養過程中，培養轉速為120-170rpm/min；培養溫度為27-35℃；培養時間為24-48h。
7.根據權利要求1所述的一種巴氏生孢八疊球菌的培養方法，其特征在于，步驟(3)中，液體芽孢培養基配方如下：
S1：以1L水計，蛋白胨3-6g、牛肉膏2-4.5g、KCl 0.8-1.5g、CaCl2 0.05-0.2g；
S2：以1L水計，MgSO4 9-14g、MnSO4·H2O 0.5-2.0g、FeSO4·7H2O 0.01-0.07g，(NH4)2SO460-150g；
S1與S2的體積比為87：13–93：7，pH為8.5-9.5。
8.根據權利要求1所述的一種巴氏生孢八疊球菌的培養方法，其特征在于，步驟(3)中，種子液與液體芽孢培養基的體積比為1-2：100。
9.根據權利要求1所述的一種巴氏生孢八疊球菌的培養方法，其特征在于，步驟(3)中，發酵培養過程中，培養轉速為120-170rpm/min；培養溫度為27-35℃。
10.根據權利要求1所述的一種巴氏生孢八疊球菌的培養方法，其特征在于，步驟(3)中，當芽孢濃度達到108-109CFU/mL時終止培養。
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