[發明專利]一種利用深色有隔內生真菌促進油茶苗生長的方法

有效

• 申請號: 202210060221.2
• 申請日: 2022-01-19
• 公開（公告）號: CN114375640B
• 公開（公告）日: 2023-01-24
• 發明（設計）人: 劉燕
• 申請（專利權）人: 貴州省生物研究所
• 主分類號: A01C1/00
• 分類號: A01C1/00;A01H4/00;A01G24/12;A01G24/15
• 代理公司: 東莞市中正知識產權事務所(普通合伙) 44231
• 代理人: 徐康

本發明公開了一種利用深色有隔內生真菌促進油茶苗生長的方法，涉及油茶苗接種相關領域，利用深色有隔內生真菌與植物共生后能促進宿主植物生長和提高宿主植物抗逆性的功效來培育油茶小苗，為培育油茶優質苗木提供一種新的方法。步驟一：制備DSE菌液；在無菌操作臺上將Acrocalymma vagum真菌的菌落接種到滅好菌的馬鈴薯葡萄糖液體培養基中，在轉速為120r/min搖床中28℃振蕩培養15d，使用滅菌紗布過濾收集菌絲團，無菌水沖洗數次后，將菌絲團打碎配制成濃度為1×105cfu/mL的菌液；步驟二：油茶小苗或油茶種子處理；步驟三：培養花盆和培養基質的消毒滅菌；步驟四：浸種；步驟五：盆栽培養；步驟六：苗期管理和移栽。

技術領域

本發明涉及油茶苗接種相關領域，具體為一種利用深色有隔內生真菌促進油茶苗生長的方法。

背景技術

深色有隔內生真菌（dark septate endophyte, DSE）是近年來比較受關注的一類內生真菌，它是指一群定殖于植物根內的小型土壤真菌，這類真菌的一般特征是菌絲橫隔明顯、顏色較深，廣泛存在于健康植物根皮層、表皮甚至維管束組織細胞內或細胞間隙，可在植物細胞內或細胞間隙形成微菌核，對根組織或細胞無負面影響。眾多研究表明，DSE能夠促進植物的生長，增加植物對非生物脅迫的耐受性，幫助植物抗旱、抗寒、耐受重金屬污染等。Acrocalymma vagum 是DSE中一種，其促進植物生長和增加植物抗性功效已經在黃芪、煙草 、冬青、構樹和紅豆樹中得到證實，表明Acrocalymma vagum是一種寄主范圍廣，促生效果明顯，且能增加植物抗性的深色有隔內生真菌，具有較好的開發利用價值。

油茶是我國重要的木本油料樹種，在我國已經有2300多年的栽培和利用歷史。油茶具有很高的經濟。其茶籽榨出來的山茶油含有80%以上不飽和脂肪酸，對人體非常有益，被稱為“東方橄欖油”；其茶枯富含茶多酚、茶皂素和茶多糖，即可開發成各種洗滌用品又可開發成有機飼料和生物農藥；而茶殼還是制作活性炭和生物栲膠的工業原料。油茶產業已經成為我國既強農又強工的產業之一。油茶苗前期生長緩慢，需要4-5年才能產果，且不耐寒冷，在許多高寒地區無法種植，將DSE應用于油茶小苗培育，對促進油茶苗生長、提高油茶苗質量和抵抗不良環境等方面都具有非常重要的意義。因此市場急需研制一種利用深色有隔內生真菌促進油茶苗生長的方法來幫助人們解決現有的問題。

發明內容

本發明的目的在于提供一種利用深色有隔內生真菌促進油茶苗生長的方法，此方法主要利用深色有隔內生真菌與植物共生后能促進宿主植物生長和提高宿主植物抗逆性的功效來培育油茶小苗，為培育油茶優質苗木提供一種新的方法。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：一種利用深色有隔內生真菌促進油茶苗生長的方法，包括如下步驟：

步驟一：制備DSE菌液；在無菌操作臺上將Acrocalymma vagum真菌的菌落接種到滅好菌的馬鈴薯葡萄糖液體培養基中，在轉速為120r/min搖床中28℃振蕩培養15d，使用滅菌紗布過濾收集菌絲團，無菌水沖洗數次后，將菌絲團打碎配制成濃度為1×105cfu/mL的菌液；

步驟二：油茶小苗或油茶種子處理；

步驟三：培養花盆和培養基質的消毒滅菌；

步驟四：浸種；選擇一個容器，清水沖洗，用75%酒精搽拭容器內部，將菌液倒入容器，放入根部滅好菌的油茶小苗或油茶種子苗，浸泡1個小時；

步驟五：盆栽培養；將滅好菌的培養基質裝入花盆中，放入浸好菌液的油茶小苗或油茶種子，用滅菌培養基質覆蓋小苗基部或油茶種子，立即用50ml菌液澆灌小苗或種子1次，無菌水澆灌，澆好水后將花盆放入溫室中培養；

步驟六：苗期管理和移栽；花盆放入溫室后按常規苗木培養，及時補充水分，培養的第2周和第3周補澆50ml菌液各1次，后繼續常規培養，3個月后上山移栽。