[發(fā)明專利]一種利用深色有隔內(nèi)生真菌促進(jìn)油茶苗生長(zhǎng)的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210060221.2
• 申請(qǐng)日: 2022-01-19
• 公開（公告）號(hào): CN114375640B
• 公開（公告）日: 2023-01-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉燕
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 貴州省生物研究所
• 主分類號(hào): A01C1/00
• 分類號(hào): A01C1/00;A01H4/00;A01G24/12;A01G24/15
• 代理公司: 東莞市中正知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)所(普通合伙) 44231
• 代理人: 徐康

1.一種利用深色有隔內(nèi)生真菌促進(jìn)油茶苗生長(zhǎng)的方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟一：制備DSE菌液；在無菌操作臺(tái)上將Acrocalymma vagum真菌的菌落接種到滅好菌的馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基中，在轉(zhuǎn)速為120r/min搖床中28℃振蕩培養(yǎng)15d，使用滅菌紗布過濾收集菌絲團(tuán)，無菌水沖洗數(shù)次后，將菌絲團(tuán)打碎配制成濃度為1×105cfu/mL的菌液；

步驟二：油茶小苗或油茶種子處理；

步驟三：培養(yǎng)花盆和培養(yǎng)基質(zhì)的消毒滅菌；

步驟四：浸種；選擇一個(gè)容器，清水沖洗，用75%酒精搽拭容器內(nèi)部，將菌液倒入容器，放入根部滅好菌的油茶小苗或油茶種子苗，浸泡1個(gè)小時(shí)；

步驟五：盆栽培養(yǎng)；將滅好菌的培養(yǎng)基質(zhì)裝入花盆中，放入浸好菌液的油茶小苗或油茶種子，用滅菌培養(yǎng)基質(zhì)覆蓋小苗基部或油茶種子，立即用50ml菌液澆灌小苗或種子1次，無菌水澆灌，澆好水后將花盆放入溫室中培養(yǎng)；

步驟六：苗期管理和移栽；花盆放入溫室后按常規(guī)苗木培養(yǎng)，及時(shí)補(bǔ)充水分，培養(yǎng)的第2周和第3周補(bǔ)澆50ml菌液各1次，后繼續(xù)常規(guī)培養(yǎng)，3個(gè)月后上山移栽。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用深色有隔內(nèi)生真菌促進(jìn)油茶苗生長(zhǎng)的方法，其特征在于，所述油茶小苗的處理方法如下：選用扦插1年左右的油茶小苗，先將小苗根部在自來水下沖洗掉泥土或基質(zhì)，再將小苗根部浸入0.1%高錳酸鉀溶液中浸泡10min，后用無菌水沖洗5次后放入菌液中浸泡。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用深色有隔內(nèi)生真菌促進(jìn)油茶苗生長(zhǎng)的方法，其特征在于，所述油茶種子的處理方法如下：選擇一個(gè)大容器，先將油茶種子用0.1%高錳酸鉀溶液浸泡30min后用無菌水清洗數(shù)遍，純河沙用0.1%高錳酸鉀溶液噴濕，在大容器底部鋪上河沙，高度為容器高度1/3，平鋪一層油茶種子于河沙表面，后用一層5cm厚的河沙覆蓋，如此反復(fù)操作直至裝滿容器，覆膜蓋好大容器保存。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用深色有隔內(nèi)生真菌促進(jìn)油茶苗生長(zhǎng)的方法，其特征在于：所述油茶種子三個(gè)月后收獲使用，油茶種子為胚根萌發(fā)狀態(tài)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用深色有隔內(nèi)生真菌促進(jìn)油茶苗生長(zhǎng)的方法，其特征在于：所述Acrocalymma vagum由野生紅豆樹根際分離獲得。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用深色有隔內(nèi)生真菌促進(jìn)油茶苗生長(zhǎng)的方法，其特征在于：所述步驟三中，培養(yǎng)基質(zhì)組分及其比例為黃壤土：蛭石：珍珠巖=3：1：1。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用深色有隔內(nèi)生真菌促進(jìn)油茶苗生長(zhǎng)的方法，其特征在于：所述步驟三中，培養(yǎng)花盆用75%酒精搽拭消毒；培養(yǎng)基質(zhì)的滅菌方法選用121℃、0.1MPa條件下高溫高壓滅菌2h與12kGy輻照滅菌其中一種。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用深色有隔內(nèi)生真菌促進(jìn)油茶苗生長(zhǎng)的方法，其特征在于：所述步驟五中，滅菌培養(yǎng)基質(zhì)的放置高度為花盆內(nèi)高度的2/3。