[發明專利]六堡茶中兒茶素類物質和生物堿的定性方法

在審

• 申請號: 202210054767.7
• 申請日: 2022-01-18
• 公開（公告）號: CN114397390A
• 公開（公告）日: 2022-04-26
• 發明（設計）人: 羅達龍;王華;覃藍;文俊萍;楊梓瑩;黃琳;李夷君;劉虹虹;蔣德莉;柯立堅
• 申請（專利權）人: 梧州市食品藥品檢驗所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/54;G01N30/72
• 代理公司: 廣州海心聯合專利代理事務所(普通合伙) 44295
• 代理人: 李哲瑜

本發明公開了六堡茶中兒茶素類物質和生物堿的定性方法，屬于茶葉成分測定的技術領域，利用該測定方法能夠準確測定六堡茶中是否含有兒茶素類物質和生物堿，該測定方法的抗干擾性較好、專屬性強；包括如下步驟：(1)取兒茶素類物質和生物堿對照品經溶解稀釋后得到對照品稀釋液；(2)取對照品稀釋液使用液相質譜聯用儀測定，建立對比質譜圖數據庫；(3)取待測定六堡茶樣品浸泡過濾，離心后取提取液，稀釋過濾得待測定樣品稀釋液；(4)取待測定樣品稀釋液使用液相質譜聯用儀測定得待測定樣品圖譜，將待測定樣品與對比質譜圖數據庫中數據匹配后得到測定結果。

技術領域

本發明涉及茶葉成分測定的技術領域，更具體地說，尤其涉及六堡茶中兒茶素類物質和生物堿的定性方法。

背景技術

六堡茶為黑茶的一種，在延緩衰老、抗菌、抗氧化方面有一定功效。六堡茶泡出的茶湯中富含兒茶素類物質，兒茶素類物質為黃烷醇的衍生物，其化合物為無色結晶形固體，該類物質能溶于水，其水溶液受熱或在無機酸存在下，容易產生聚合形成無定形鞣質。兒茶素類物質和生物堿同屬茶葉中的兩大重要機能性成分。兒茶素類物質包括沒食子酸、表沒食子酸兒茶素、兒茶素、表兒茶素、表沒食子兒茶素沒食子酸酯和表兒茶素沒食子酸酯。

兒茶素類物質是天然的油脂抗氧化劑，抗氧化活性比維他命E高，并且可以清除人體產生的自由基，以保護細胞膜的作用，進而有延緩衰老的功效，其生物活性作用也受到了廣泛的關注。六堡茶作為黑茶的功能成分，兒茶素類物質和生物堿在這些功效中發揮著至關重要的作用。一般會使用的液相方法測對該類物質作定性，這種測定方法需要使用標準物質對色譜峰保留時間進行定性，在茶葉復雜基質中分離目標峰與雜質峰難度較大。如沒食子酸在液相測定中保留較差，測定中容易受到與其共流出的物質干擾，在對這些共流出物與目標物分離會耗費較長的時間，由于被測樣品基質有一定區別，使用液相法時需先對被測樣品進行一定預實驗后，確定梯度方法才能正式開展檢測。操作過程復雜，抗干擾性不好。因此，亟待發明一種能有效對六堡茶中兒茶素類物質和生物堿的定性方法，以測定出六堡茶中是否含有兒茶素類物質和生物堿。

發明內容

本發明的目的在于提供六堡茶中兒茶素類物質和生物堿的定性方法，利用該測定方法能夠準確測定六堡茶中是否含有兒茶素類物質和生物堿，該測定方法的抗干擾性較好、專屬性強。

本發明的技術方案如下：

六堡茶中兒茶素類物質和生物堿的定性方法，包括如下步驟：

(1)取兒茶素類物質和生物堿對照品經溶解稀釋后得到對照品稀釋液；

(2)取步(1)所得對照品稀釋液使用液相質譜聯用儀測定，建立對比質譜圖數據庫；

(3)取待測定六堡茶樣品浸泡過濾，離心后取提取液，稀釋過濾得待測定樣品稀釋液；

(4)取步(3)所得待測定樣品稀釋液使用液相質譜聯用儀測定得待測定樣品圖譜，將待測定樣品與對比質譜圖數據庫中數據匹配后得到測定結果。進一步的，所述的步驟(1)中，將兒茶素類物質和生物堿對照品經甲醇溶解稀釋后制備得到10μg/mL的對照品稀釋液。

進一步的，所述的步驟(2)和步驟(4)的測定包括液相色譜測定和質譜測定：

所述液相色譜測定條件為：

色譜柱：C₁₈色譜柱，3.0mm×15 0mm，2.7μm；進樣量：3μL；柱溫：30℃；流速：0.4mL/min；流動相：A:0.1％甲酸水溶液，B：乙腈；流動相梯度：0～1min：2％B；1～5min：2％B→10％B；5～15min：10％B→30％B；15～20min：30％B→40％B；20～23min：40％B→50％B；23～25min：50％B→60％B；25～27min：60％B→95％B；27～30min：95％B；30.01～35min：2％B；

所述質譜測定條件為：