[發明專利]六堡茶中兒茶素類物質和生物堿的定性方法

在審

• 申請號: 202210054767.7
• 申請日: 2022-01-18
• 公開（公告）號: CN114397390A
• 公開（公告）日: 2022-04-26
• 發明（設計）人: 羅達龍;王華;覃藍;文俊萍;楊梓瑩;黃琳;李夷君;劉虹虹;蔣德莉;柯立堅
• 申請（專利權）人: 梧州市食品藥品檢驗所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/54;G01N30/72
• 代理公司: 廣州海心聯合專利代理事務所(普通合伙) 44295
• 代理人: 李哲瑜

1.一種六堡茶中兒茶素類物質和生物堿的定性方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)取兒茶素類物質和生物堿對照品經溶解稀釋后得到對照品稀釋液；

(2)取步(1)所得對照品稀釋液使用液相質譜聯用儀測定，建立對比質譜圖數據庫；

(3)取待測定六堡茶樣品浸泡過濾，離心后取提取液，稀釋過濾得待測定樣品稀釋液；

(4)取步(3)所得待測定樣品稀釋液使用液相質譜聯用儀測定得待測定樣品圖譜，將待測定樣品與對比質譜圖數據庫中數據匹配后得到測定結果。

2.根據權利要求1所述的六堡茶中兒茶素類物質和生物堿的定性方法，其特征在于，所述的步驟(1)中，將兒茶素類物質和生物堿對照品經甲醇溶解稀釋后制備得到10μg/mL的對照品稀釋液。

3.根據權利要求3所述的六堡茶中兒茶素類物質和生物堿的定性方法，其特征在于，所述的步驟(2)和步驟(4)的測定包括液相色譜測定和質譜測定：

所述液相色譜測定條件為：

色譜柱：C₁₈色譜柱，3.0mm×15 0mm，2.7μm；進樣量：3μL；柱溫：30℃；流速：0.4mL/min；流動相：A:0.1％甲酸水溶液，B：乙腈；流動相梯度：0～1min：2％B；1～5min：2％B→10％B；5～15min：10％B→30％B；15～20min：30％B→40％B；20～23min：40％B→50％B；23～25min：50％B→60％B；25～27min：60％B→95％B；27～30min：95％B；30.01～35min：2％B；

所述質譜測定條件為：

干燥氣溫度：290℃；干燥器流速：11L/min；霧化器壓力：45psi；鞘氣溫度：325℃；鞘氣流速：8L/min；毛細管電壓：3500V；噴嘴電壓：250V；裂解電壓380V；掃描模式為自動二級采集模式，正模式，掃描范圍1級100～1000m/z，掃描范圍2級50～500m/z，碰撞能量5～40V。

4.根據權利要求1所述的六堡茶中兒茶素類物質和生物堿的定性方法，其特征在于，所述的步驟(3)中，將所述的待測定六堡茶樣品放入沸水中浸泡10min，加入六堡茶的質量與沸水體積的比為1:10g/mL浸泡后的液體放至室溫后在4℃下離心15min，離心速度為9000r/min。

5.根據權利要求1所述的六堡茶中兒茶素類物質和生物堿的定性方法，其特征在于，所述的步驟(4)中，測定結果包括是否含有兒茶素類物質和生物堿，所述的兒茶素類物質包括沒食子酸、表沒食子酸兒茶素、兒茶素、表兒茶素、表沒食子兒茶素沒食子酸酯和表兒茶素沒食子酸酯，所述的生物堿包括咖啡因、可可堿和茶堿。