[發明專利]一種杜松烷倍半萜化合物及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202210049311.1
• 申請日: 2022-01-17
• 公開（公告）號: CN114436802B
• 公開（公告）日: 2023-06-09
• 發明（設計）人: 陳德力;馬國需;楊云;王燦紅;魏建和;許旭東
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院藥用植物研究所海南分所
• 主分類號: C07C49/757
• 分類號: C07C49/757;C07C49/733;C07C49/747;C07C45/79;C07D307/92;C07D311/16;A61P35/00;A61P25/20;A61P25/00;A01N43/08;A01N43/16;A01N35/06;A01P3/00;A23B
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 趙曉娟

1.一種杜松烷倍半萜化合物的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：

（1）將干燥粉碎后的黃槿莖用二氯甲烷提取，得到黃槿提取液；

（2）所述黃槿提取液經硅膠柱層析、混合洗脫劑洗脫，用薄層色譜分析，展開劑為石油醚、CH₂Cl₂、MeOH的體積比2:4-9:5.5，得到Frs.?C、Frs.?D和Frs.?E；所述混合洗脫劑為石油醚與CH₂Cl₂以100:0-0:100比例混合，或石油醚與MeOH以50:1?-?1:1比例混合；

（3）Frs.?C經硅膠柱層析，用石油醚與CH₂Cl₂以6:1-0:100的體積比洗脫或CH₂Cl₂與MeOH以40:1-1:1的體積比洗脫，得到Fr.?C3餾分和Fr.?C5餾分；

Fr.?C5采用半制備液相色譜分離，甲醇-水以3.9-4.2:1體積比洗脫，得到1H和3H組分；

在SB-phenyl柱上用65%甲醇-水以體積比1.8-2.2:1純化1H組分，得到化合物1；

在SB-phenyl柱上用65%的甲醇-水以體積比1.8-2.2:1梯度純化3H組分，得到化合物3；

Fr.?C3采用高效液相色譜，85%甲醇-水以2.6-3.3:1體積比梯度洗脫，在YMC?C18色譜柱上純化，得到化合物5；

（4）Frs.?D?經硅膠柱層析，用石油醚與CH₂Cl₂以6:1?-?0:100的體積比洗脫或CH₂Cl₂與MeOH以40:1?-?1:1的體積比洗脫，得到Fr.?D1和Fr.D3；

Fr.?D1用半制備高效液相色譜法分離，甲醇-水以6.5-7.2:3體積比洗脫，得到化合物1和2；

Fr.?D3采用高效液相色譜法，65%甲醇-水以體積比2.6-3.3:2純化，得到化合物6；

（5）Frs.?E經硅膠柱層析，用石油醚與CH₂Cl₂以1:1-?0:100的體積比洗脫或CH₂Cl₂與MeOH以40:1-1:1的體積比洗脫，得到Fr.?E1；

Fr.?E1經硅膠柱層析用石油醚與CH₂Cl₂以4:1-0:100的體積比洗脫或CH₂Cl₂與MeOH以99:1?-?1:1的體積比洗脫，得到Fr.?E1-2和Fr.?E1-5；

在SB-phenyl柱上，以75%甲醇-水以體積比1.8-2.3:1為溶劑，采用高效液相色譜法對Fr.?E1-2進行純化，得到化合物4和化合物7；

在SB-phenyl柱上，以70%甲醇-水體積比2.6-3.5:1為溶劑，采用高效液相色譜法對Fr.E1-5進行分離，得到化合物8；

所述化合物1-8的結構式如下：

。

2.根據權利要求1所述的一種杜松烷倍半萜化合物的制備方法，其特征在于：所述步驟（2）中收集第一Rf值在0.15-0.25之間的餾分為Frs.?C，第二Rf值在0.25-0.40之間的餾分為Frs.?D，第三Rf值在0.40-0.50之間的餾分為Frs.?E。

3.根據權利要求1所述的一種杜松烷倍半萜化合物的制備方法，其特征在于：

所述步驟（3）中Frs.?C洗脫的流速為15ml/min，Fr.?C3的保留時間RT為12.5min，Fr.C5的保留時間RT為17.8min；

所述步驟（4）中Frs.?D洗脫的流速為15ml/min，Fr.?D1的保留時間RT為10.6min；Fr.D3的保留時間RT為16.3min；

所述步驟（5）中Frs.?E洗脫的流速為15ml/min，Fr.?E1的保留時間RT為12.2min。