[發(fā)明專利]一株抗病促生草莓生物菌及生物有機(jī)肥制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210042466.2
• 申請日: 2022-01-14
• 公開（公告）號: CN115925469A
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 姚燕來;楊肖芳;朱為靜;洪磊東;洪春來;朱鳳香;王衛(wèi)平
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號: C05G3/00
• 分類號: C05G3/00;C05G3/60;C05G3/80;C12N1/20;C12N1/02;C12R1/07
• 代理公司: 杭州君度專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 33240
• 代理人: 沈志良

本發(fā)明所述的一株抗病促生草莓生物菌保藏編號為CGMCCNo.19859，所述的抗病促生草莓生物菌應(yīng)用于肥料中。所述的抗病促生草莓生物菌劑的制備方法包括菌株生物菌劑的制備、抗病促生混合菌劑的制備和生物有機(jī)肥的制備。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)微生物領(lǐng)域，尤其涉及一株具有養(yǎng)分活化、促生、拮抗功能的微生物菌以及由該微生物菌制取生物有機(jī)肥的方法。

背景技術(shù)

草莓屬薔薇科草莓屬植物，因其色澤艷麗、香甜味美且富含豐富的維生素、胡蘿卜素、鞣酸等多種營養(yǎng)物質(zhì)，具有較高的營養(yǎng)和經(jīng)濟(jì)價值，市場需求量較大，是世界范圍內(nèi)廣泛種植的經(jīng)濟(jì)作物之一。

草莓產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，長期大面積連作，造成土壤生態(tài)破壞加劇，連作障礙問題日趨嚴(yán)重，病蟲害增加，草莓的可持續(xù)發(fā)展受到制約。尤其是草莓栽培主要采用設(shè)施栽培，設(shè)施栽培環(huán)境下，因缺少雨水淋洗，溫濕度高，土壤次生鹽堿化、酸化、病原菌積累問題尤其突出，土壤微生物區(qū)系劣變，病害高發(fā)，據(jù)報道連作4年草莓能減產(chǎn)40％以上。目前，大家公認(rèn)的連作障形成機(jī)理主要包括土壤質(zhì)量退化、病原微生物積累、土壤營養(yǎng)元素失衡、化感作用、土壤微生態(tài)失衡等多個方面。而土壤微生態(tài)失衡是研究者所公認(rèn)的連作障礙發(fā)生的根本。

現(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)，草莓連作3年后的土壤中優(yōu)勢真菌與新茬土壤存在顯著差異。新茬土壤中占優(yōu)勢的真菌豐度值大幅下降，而連作土壤中豐度值增高的真菌大多與植物病害發(fā)生相關(guān)。如連作土壤中占優(yōu)勢的絲核菌、輪枝菌、鐮刀菌等在連作后大量增加，這些病原菌能引起多種植物(包括草莓)黑根病、立枯病、葉腐病、莖腐、枯萎病等病害的發(fā)生，從而加重連作障礙。

因此，如何通過采用現(xiàn)代生物技術(shù)，利用有益微生物，調(diào)控種植草莓土壤微生物區(qū)系，改善土壤理化性質(zhì)，抑制病原微生物的生長，從而有效防控土傳病害的發(fā)生，被認(rèn)為是解決草莓種植土壤的有效方法。但目前還沒有一種效果明顯的此類微生物菌及其對應(yīng)的肥料。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是提供一株抗病促生草莓生物菌及生物有機(jī)肥制備方法。

本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有草莓連作土壤存在的連作障礙問題。

本發(fā)明通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)：

本發(fā)明所述的一種抗病促生草莓生物菌為解淀粉孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)，已于2020年5月21日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，保藏編號為CGMCCNo.19859。

所述的一種抗病促生草莓生物菌應(yīng)用于肥料中，所述的肥料為微生物肥料。

所述的一種抗病促生草莓生物菌的分離篩選方法，所述的分離篩選方法至少包括如下步驟：

根際功能微生物菌株篩選培養(yǎng)基根際功能微生物菌株的篩選采用LB培養(yǎng)基。

(1)土壤樣品的采集與根際功能微生物的分離

采集溫州蒼南縣馬站鎮(zhèn)設(shè)施種植大棚發(fā)病區(qū)塊內(nèi)健壯的植株，輕輕帶土拔出植株，帶回實(shí)驗室用于抗病促生菌株的分離篩選，采集時間為2019年。分離篩選時，輕輕抖落植株根系上松散的附著土，將植株自根莖處剪斷，稱取10g帶根際土的植物根系置于盛有滅菌玻璃珠和90mL無菌水的錐形瓶中，28℃、170r·min^-1振蕩30min，得到懸浮液，按照梯度濃度稀釋，涂布于LB培養(yǎng)基上(選擇10^－4、10^－5、10^－6三個梯度進(jìn)行涂布，每個梯度三次重復(fù))，恒溫培養(yǎng)箱中28℃倒置培養(yǎng)18h，挑取生長迅速、不同形態(tài)的單菌落于新的平板上，劃線純化3-4次，分別編號，挑取菌落加入體積分?jǐn)?shù)為15％的滅菌甘油于-80℃保藏待用。

(2)拮抗功能微生物的篩選