[發(fā)明專利]一種可用于外泌體示蹤的重組胰腺癌細胞及其應用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202210040013.6 | 申請日： | 2022-01-14 |
| 公開（公告）號： | CN115305253A | 公開（公告）日： | 2022-11-08 |
| 發(fā)明（設計）人： | 肖明兵;吳桐;陳飛;林仁杰;季潔;馬彭;崔小鵬;錢坤艷;徐偉松 | 申請（專利權）人： | 南通大學附屬醫(yī)院 |
| 主分類號： | C12N15/62 | 分類號： | C12N15/62;C12N5/10;C12N15/85;C12Q1/02;G01N33/574;G01N33/58;G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京方圓嘉禾知識產權代理有限公司 11385 | 代理人： | 戴嵩瑋 |
| 地址： | 226001 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 外泌體示蹤 重組 胰腺 癌細胞 及其 應用 | ||
1.一種可用于外泌體示蹤的重組胰腺癌細胞，所述重組胰腺癌細胞包含重組載體；所述重組載體上插入有目的基因pHluorin_M153R-CD63；所述目的基因pHluorin_M153R-CD63為氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白的編碼基因。
2.根據(jù)權利要求1所述的重組胰腺癌細胞，其特征在于，所述重組載體的原始載體包括pCDH-CMV-MCS-EF1-PURO。
3.根據(jù)權利要求2所述的重組胰腺癌細胞，其特征在于，所述目的基因pHluorin_M153R-CD63在pCDH-CMV-MCS-EF1-PURO上的插入位點的5’端的限制性酶切位點為EcoR I，3’端的限制性酶切位點為Not I。
4.權利要求1～3任意一項所述的重組胰腺癌細胞在制備用于胰腺癌細胞外泌體示蹤的試劑或試劑盒中的應用。
5.一種胰腺癌細胞外泌體示蹤的方法，包括以下步驟：
使用熒光顯微鏡對權利要求1～3任意一項所述的重組胰腺癌細胞進行鏡下觀察。
6.根據(jù)權利要求5所述的方法，其特征在于，所述鏡下觀察包括活細胞觀察和/或細胞免疫熒光觀察。
7.根據(jù)權利要求5或6所述的方法，其特征在于，所述觀察的內容包括如下項目中的一種或幾種：
(1)觀察細胞外外泌體的陽性熒光標記；
(2)觀察細胞外外泌體的尋徑軌跡；
(3)觀察多囊泡體與細胞質膜的融合情況。
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