[發明專利]一種八角楓總生物堿的提取分離純化及檢測方法

有效

• 申請號: 202210039771.6
• 申請日: 2022-01-14
• 公開（公告）號: CN114533771B
• 公開（公告）日: 2022-12-02
• 發明（設計）人: 劉耀;張永萍;徐劍;劉杰;曹國瓊;程純
• 申請（專利權）人: 貴州中醫藥大學
• 主分類號: A61K36/185
• 分類號: A61K36/185;G01N21/78
• 代理公司: 貴陽貴知知識產權代理事務所(普通合伙) 52115
• 代理人: 曾香蘭;蔣琳琳

本發明涉及一種八角楓總生物堿的提取分離純化及檢測方法，采用D101型大孔吸附樹脂對八角楓總生物堿進行分離純化，所得八角楓浸膏中總生物堿的純度由21.61％提高到了63.03％；采用酸性染料比色法測定八角楓中總生物堿，精密度RSD為0.34％；重復性RSD為1.40％；加樣回收率為102.72％，RSD為2.66％，能真實、有效、準確的測定八角楓中毒藜堿含量的方法，保證用藥安全有效。

技術領域

本發明涉及醫藥發明領域，具體涉及一種八角楓總生物堿的提取分離純化及 檢測方法。

背景技術

八角楓(Alangium chinense)，別名：華瓜木、白龍須、木八角、橙木。 落葉小喬木或灌木，高4—5m。葉互生，形狀不一，主要分布于中國南部廣大地 區；亞洲東部和東南部亦產。生于山野、灌叢和雜林中，村邊路旁也常見。性溫 味辛、苦，具有祛風除濕，舒筋活絡，散淤止痛之功效。

八角楓清熱解毒，活血散瘀。根和皮藥效最好，根名白龍須，莖名白龍條。 能祛風除濕、舒筋活絡、散瘀止痛，用于風濕痹痛、四肢麻木、跌打損傷；葉用 于跌打骨折，外刀傷出血；花用于頭風痛及胸腹脹滿。

八角楓的生物堿類成分具有鎮痛、消炎、抗風濕作用、松弛肌肉作用、對中 樞神經的作用、心血管系統的作用等藥理活性，其中主要的藥理活性成分是八角 楓中毒藜堿類。

目前，八角楓中的生物堿多采用HPLC測定：

1、“HPLC測定制八角楓中八角楓堿的含量”，胡玉霞和芳余啟榮高 柏麗。建立制八角楓中八角楓堿的含量測定方法。方法:色譜柱采用Alltech Apollo C18(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈～緩沖液(0.2g庚烷磺酸鈉、3.5g 磷酸二氫鉀定容至1 000mL)(9∶91)為流動相,流速1.0mL·min～1,檢測波長 259nm,柱溫30℃。結果:八角楓堿在0.024 95～0.499g·L～1線性關系良好 (r＝0.999 9,n＝5),平均回收率98.73％(n＝6),RSD0.915％。

2、“高效液相色譜法測定黔產民族藥材八角楓中毒藜堿的含量”，劉毅、 張麗艷、張永萍、汪毅、徐莛婷；貴陽中醫學院。公開了測定黔產民族藥材八角 楓不同產地和不同藥用部位(須根及支根)中毒藜堿的含量。方法:采用色譜柱 SB～C18(150mm×4.6mm,5μm),以甲醇～0.1％的三乙胺(8∶92,磷酸調pH3.4) 為流動相,流速1.0mL.min～1；檢測波長259nm,柱溫25℃。結果:毒藜堿在0.086 41.500 0μg范圍內線性關系良好,r＝0.999 9；平均回收率為98.22％,RSD為2.08％ (n＝6),不同產地八角楓須根中毒藜堿含量比支根高,須根為0.122 6％0.234 9％, 支根為0.028 5％0.137 7％。

3、“風濕定膠囊不良反應原因分析”，劉萍、段雅彬、張恩源、綦凱、張 王成；青海大學附屬醫院。建立八角楓藥材和風濕定膠囊中毒藜堿的含量測定方 法,同時對八角楓[Acangium chinense(Lour)Harms]藥材不同用藥部位以及炮 制后毒藜堿含量變化進行分析比較。方法:采用高效液相色譜法(high performance liquid chromatography,HPLC)分別測定八角楓藥材須根、支根、 主根中以及炮制后毒藜堿的含量,同時對風濕定膠囊中毒藜堿的含量進行測定, 以C18,磷酸鹽緩沖液～甲醇(76∶24)為流動相,檢測波長260nm。結果:引發 風濕定膠囊不良反應的原因與處方中君藥八角楓藥材的使用部位和含量有關,而且不同部位的毒藜堿含量分布分別為須根支根主根,水煮后毒藜堿含量均下降 約30％左右,風濕定膠囊中毒藜堿的含量每g超過0.45mg以上,發生不良反應的 風險增大。