[發(fā)明專利]脆弱擬桿菌及其兩性離子莢膜多糖在制備用于治療呼吸系統(tǒng)腫瘤藥物中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210034079.4
• 申請日: 2022-01-12
• 公開（公告）號(hào): CN114404455B
• 公開（公告）日: 2023-07-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王薇;蔡琰;鄭麗君;梁德寶
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州知易生物科技有限公司
• 主分類號(hào): A61K35/741
• 分類號(hào): A61K35/741;A61K31/715;A61K45/06;A61P35/00;A61P35/04;C08B37/00;A23L33/135;A23L33/125;A23C9/16;A23C9/156;A23C9/152;A23C19/09;A23G9/36;A23G9/
• 代理公司: 北京知元同創(chuàng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11535
• 代理人: 彭勁松

1.一種脆弱擬桿菌和/或其兩性離子莢膜多糖在制備預(yù)防和/或治療呼吸系統(tǒng)腫瘤的產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述脆弱擬桿菌為保藏編號(hào)為CGMCCNo.10685的脆弱擬桿菌ZY-312；

所述呼吸系統(tǒng)腫瘤為非小細(xì)胞肺癌、小細(xì)胞肺癌、鼻咽癌；

所述兩性離子莢膜多糖含莢膜多糖A，所述莢膜多糖A的結(jié)構(gòu)如下所示：

所述莢膜多糖A的重均分子量為80-90kD。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述脆弱擬桿菌是活菌、形態(tài)結(jié)構(gòu)完整的滅活菌、形態(tài)結(jié)構(gòu)不完整的滅活菌中的一種以上；

和/或，所述脆弱擬桿菌是脆弱擬桿菌活菌體、滅活的脆弱擬桿菌中的一種或多種。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述兩性離子莢膜多糖中莢膜多糖A的含量超過95wt％。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于，所述兩性離子莢膜多糖的制備方法包括以下步驟：

(1)將發(fā)酵培養(yǎng)后的脆弱擬桿菌菌液離心收集沉淀物，即得脆弱擬桿菌菌泥；取菌泥，加入菌泥質(zhì)量3～10倍的純化水使菌體重懸，用酸溶液調(diào)節(jié)其pH至2.0～4.5，50～120℃提取0.5～3.0h，冷卻至室溫，常溫離心，取上清，得到粗糖溶液；

(2)粗糖溶液經(jīng)超濾膜超濾濃縮、除小分子雜質(zhì)，至電導(dǎo)率穩(wěn)定，收集回流液；

(3)回流液中加入等體積40mmol/L?Tris-HCl轉(zhuǎn)鹽；離子交換柱層析，梯度洗脫，分段收集，SEC-HPLC跟蹤監(jiān)測，合并206nm吸收峰為單一、對稱峰的組分，超濾膜超濾，加入純化水反復(fù)超濾，至電導(dǎo)率穩(wěn)定，收集回流液，凍干，得到脆弱擬桿菌兩性離子莢膜多糖。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述兩性離子莢膜多糖的制備方法中，

步驟(1)中所述離心為11000～13000g離心8～12min；

和/或，步驟(1)中所述酸溶液是有機(jī)酸、無機(jī)酸和酸性緩沖液中的一種或多種；

和/或，步驟(2)中所述超濾膜為100、50、30、10、5、3KD或者上述任意兩個(gè)分子量值之間的范圍；

和/或，步驟(3)中所述離子交換柱為DEAE?Sepharose?Fast?Flow的16mm×200mm，層析時(shí)的流速15～25mL/min，pH5.0～9.0含0.2mol/L?NaCl20mmol/L?Tris-HCl梯度洗脫25個(gè)柱體積，分段收集，100mL/瓶；所述超濾膜為10KD。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述兩性離子莢膜多糖的制備方法中，無機(jī)酸是鹽酸、硫酸、磷酸；有機(jī)酸是乙酸、檸檬酸。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述產(chǎn)品為藥品。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，

所述藥品為脆弱擬桿菌或其兩性離子莢膜多糖單獨(dú)應(yīng)用、或脆弱擬桿菌和其兩性離子莢膜多糖聯(lián)合應(yīng)用、或脆弱擬桿菌或其兩性離子莢膜多糖分別與其他藥物聯(lián)用、或脆弱擬桿菌和其兩性離子莢膜多糖一起與其他藥物聯(lián)用。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，

所述其他藥物為乳酸菌。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，

所述乳酸菌為ATCC?53103乳酸菌。

11.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的應(yīng)用，其特征在于，

所述藥品為人用藥或動(dòng)物用藥；

和/或，所述藥品的劑型包括丸劑、片劑、顆粒劑、膠囊、口服液或管飼制劑。