[發明專利]一種鑒別長吻鮠遺傳性別的分子標記及應用

有效

• 申請號: 202210030085.2
• 申請日: 2022-01-12
• 公開（公告）號: CN114214433B
• 公開（公告）日: 2023-08-01
• 發明（設計）人: 羅輝;葉華;周劍;李雨
• 申請（專利權）人: 西南大學;四川省農業科學院水產研究所
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6879;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 重慶晶智匯知識產權代理事務所(普通合伙) 50229
• 代理人: 李靖

1.一種鑒別長吻鮠遺傳性別的分子標記，其特征在于：所述分子標記為長吻鮠第7號染色體第1130404位堿基處一段長32bp的插入/缺失的核苷酸序列，為SEQ?ID?NO.1所示，雌性個體具有SEQ?ID?NO.1序列，雄性個體缺失SEQ?ID?NO.1序列。

2.用于檢測權利要求1所述分子標記的特異性引物，其特征在于：前引物F1，核苷酸序列為SEQ?ID?NO.2所示，后引物R1，核苷酸序列為SEQ?ID?NO.3所示。

3.采用如權利要求1所述分子標記鑒別長吻鮠遺傳性別的檢測方法，其特征在于：

（1）提取待測基因組DNA；

（2）以待測基因組DNA為模板，采用權利要求2所述特異性引物進行PCR擴增，PCR反應體系為：無Mg⁺?的10?x?Buffer?1?μL，25?mM?MgCl₂?1μL，dNTP?Mix?1.6μL，正向、反向引物各10?mM各1μL，模板?DNA?1μL,?5U/μL?TaqDNA聚合酶0.2?μL，ddH₂O?13.2μL；所述dNTP?Mix中每種dNTP的濃度為10?mM；

PCR反應程序為：94℃預變性5?min；94℃變性30?s,?50?℃退火30?s,?72?℃?延伸45s，循環30次;?72?℃延伸10?min；

（3）根據電泳圖對長吻鮠的遺傳性別進行判斷，僅存在410bp特異性片段的個體為雌性長吻鮠，有410?bp?和378?bp兩條片段的個體為雄性長吻鮠。

4.一種用于鑒別長吻鮠遺傳性別的試劑盒，其特征在于：該試劑盒包括如下引物，前引物為F1，核苷酸序列為SEQ?ID?NO.2所示，后引物為R1，核苷酸序列為SEQ?ID?NO.3所示。