[發明專利]瓦倫烯合酶突變體及瓦倫烯高產菌株

在審

• 申請號: 202210027320.0
• 申請日: 2022-01-11
• 公開（公告）號: CN116463325A
• 公開（公告）日: 2023-07-21
• 發明（設計）人: 葉紫玲
• 申請（專利權）人: 武漢合生科技有限公司
• 主分類號: C12N9/88
• 分類號: C12N9/88;C12N15/60;C12N15/81;C12N1/19;C12P5/00;C12R1/865
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 張培培

1.瓦倫烯合酶突變體，其特征在于：所述的瓦倫烯合酶突變體與野生型瓦倫烯合酶相比，含有下述突變位點的任一種：

(1)I533V、R336K；

(2)I533V、R336K、H196R、D176E；

(3)I533V、R336K、R306K；

(4)I533V、R336K、K325E；

(5)I533V、R336K、H196R、D176E、R306K、K325E；

所述的野生型瓦倫烯合酶的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

2.編碼權利要求1所述的瓦倫烯合酶突變體的基因。

3.一種重組質粒，其特征在于：含有權利要求2所述的基因。

4.一種重組細胞，其特征在于：含有權利要求2所述的基因。

5.權利要求1所述的瓦倫烯合酶突變體、權利要求2所述的基因、權利要求3所述的重組質粒或權利要求4所述的重組細胞在生產瓦倫烯和諾卡酮中的應用。

6.一種瓦倫烯高產菌株，其特征在于：含有權利要求2所述的基因。

7.根據權利要求6所述的瓦倫烯高產菌株，其特征在于：含有編碼法尼基焦磷酸合酶的基因ERG20；還含有甲羥戊酸途徑基因，所述的甲羥戊酸途徑基因包括：編碼乙酰乙酰輔酶A硫解酶的基因ERG10，編碼HMG-CoA合酶的基因ERG13，編碼HMG-CoA還原酶的基因tHMG1，編碼甲羥戊酸激酶的基因ERG12，編碼甲羥戊酸-5-磷酸激酶的基因ERG8，編碼甲羥戊酸焦磷酸脫羧酶的基因MVD1，編碼異戊二烯焦磷酸異構酶的基因IDI1。

8.根據權利要求7所述的瓦倫烯高產菌株，其特征在于：MVA途徑基因法尼烯焦磷酸合酶基因的拷貝數為ERG10、ERG13、tHMG1、ERG12、ERG8、MVD1、IDI1、ERG20＝2、2、3、2、2、2、2、2，權利要求2所述的基因的拷貝數為2。

9.根據權利要求6-8任一項所述的瓦倫烯高產菌株，其特征在于：所述的瓦倫烯高產菌株的宿主為釀酒酵母。

10.根據權利要求9所述的瓦倫烯高產菌株，其特征在于：所述的瓦倫烯高產菌株敲除了GAL80基因。