[發明專利]用于檢測HLA-B*15:02等位基因的引物組及其應用在審
| 申請號: | 202210022817.3 | 申請日: | 2022-01-10 |
| 公開(公告)號: | CN114350786A | 公開(公告)日: | 2022-04-15 |
| 發明(設計)人: | 關國良;陳建雄;陳薛名;陳巧玲;吳婧 | 申請(專利權)人: | 常州先趨醫療科技有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/6883 | 分類號: | C12Q1/6883;C12Q1/6844;C12Q1/6825;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京細軟智谷知識產權代理有限責任公司 11471 | 代理人: | 劉靜榮 |
| 地址: | 213000 江蘇省常州市武進區常武中路1*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 用于 檢測 hla 15 02 等位基因 引物 及其 應用 | ||
1.用于檢測HLA-B*15:02等位基因的引物組,其特征在于,所述引物組包括引物組A和引物組B,其中,引物組A中的引物的核苷酸序列如下:
SEQ ID NO.1:5’-TGAGGTTCGACAGCGACG-3’,
SEQ ID NO.2:5’-TCACCGGCCTCGCTCT-3’,
SEQ ID NO.3:5’-TCCGGTCCCAATACTCCGGCTTTTCCGCGAGTCCGAGGAT-3’,
SEQ ID NO.4:5’-CACACAGATCTCCAAGACCTTTTAGTAGCCGCGCAGGTT-3’,
SEQ ID NO.5:5’-TCCTGCTCTATCCATGGCG-3’,
SEQ ID NO.6:5’-AACACACAGACTTACCGAGAGA-3’,
引物組B中的引物的核苷酸序列如下:
SEQ ID NO.8:5’-GATTACATCGCCCTGAACGA-3’,
SEQ ID NO.9:5’-CCCACTGCCCCTGGTA-3’,
SEQ ID NO.10:5’-TCACGGGCCGCCTCCCACTTTTGACCTGAGCTCCTGGACC-3’,
SEQ ID NO.11:5’-TGAGAGCCTACCTGGAGGTTTTCGCTGCAGCGTCTCCTT-3’,
SEQ ID NO.12:5’-TGATCTGAGCCGCCGTGTC-3’,
SEQ ID NO.13:5’-GTGGCTCCGCAGATACCTGG-3’。
2.根據權利要求1所述的用于檢測HLA-B*15:02等位基因的引物組,其特征在于,引物組A還包含探針A,探針A的核苷酸序列如下:
SEQ ID NO.7:5’-TGTGTGTTCCG-3’;并且
引物組B還包含探針B,探針B的核苷酸序列如下:
SEQ ID NO.14:5’-CTGCTCCGCC-3’。
3.權利要求1或2所述的用于檢測HLA-B*15:02等位基因的引物組的應用。
4.權利要求1或2所述的引物組在制備檢測HLA-B*15:02基因型的試劑盒中的應用。
5.權利要求1或2所述的引物組在檢測個體中HLA-B*15:02基因型方法中的應用。
6.檢測HLA-B*15:02基因型的方法,其特征在于,所述方法包括使用權利要求1或2所述的引物組,并通過環介導等溫擴增-生物傳感芯片-人工智能技術平臺對待測樣品進行檢測的步驟。
7.根據權利要求6所述的檢測HLA-B*15:02基因型的方法,其特征在于,所述環介導等溫擴增的程序包括進行含有引物組A的LAMP擴增反應,以及進行含有引物組B的LAMP擴增反應。
8.根據權利要求6所述的檢測HLA-B*15:02基因型方法,其特征在于,含有引物組A的LAMP擴增反應:將待測樣品用超純水稀釋后,在90~96℃條件下裂解,得到裂解液;裂解液與變色LAMP混合液、引物組A在65~75℃條件下進行LAMP擴增,15~25min后擴增結束。
9.根據權利要求6所述的檢測HLA-B*15:02基因型方法,其特征在于,含有引物組B的LAMP擴增反應:將待測樣品用超純水稀釋后,在90~96℃條件下裂解,得到裂解液;裂解液與變色LAMP混合液、引物組B在65~75℃條件下進行LAMP擴增,15~25min后擴增結束。
10.根據權利要求6~9任一項所述的檢測HLA-B*15:02基因型方法,其特征在于,環介導等溫擴增的擴增產物與生物傳感芯片上的探針結合,生物化學信號轉化成電信號,并由人工智能技術平臺輸出檢測結果。
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