[發明專利]一種高產率膠原海綿的制備工藝

有效

• 申請號: 202210018910.7
• 申請日: 2022-01-10
• 公開（公告）號: CN114032623B
• 公開（公告）日: 2022-03-29
• 發明（設計）人: 張孌;張偉;張伊驍;孫冰冰
• 申請（專利權）人: 天新福（北京）醫療器材股份有限公司
• 主分類號: D01F4/00
• 分類號: D01F4/00;D01F1/10;C08J9/28;C08L89/00;C08L5/08;C07K14/78;C07K1/14;C12P21/06
• 代理公司: 北京細軟智谷知識產權代理有限責任公司 11471
• 代理人: 劉靜榮

本發明涉及一種高產率膠原蛋白纖維的制備工藝，選取富含膠原的動物組織，切成片或塊，形成組織片或組織塊；經前處理、酶反應、粉碎、堿處理、得到的保持三股螺旋結構的膠原；然后經凍干過程制成膠原海綿。本發明的有益效果：本發明在去除端肽、彈性蛋白、滅活病毒的前提下，具有更高的提取效率，雜蛋白去除徹底，所制得的膠原純度較高。與酸溶膠原海綿相比，本發明制備的膠原海綿具有更高的抗拉強度、脹破強度和更長的降解周期。同時，本發明工藝用水的使用量較少，反應裝置的規模與其他酸或酶提取法相比較小，可大幅度節約生產場地。

技術領域

本發明涉及一種膠原蛋白纖維，具體涉及一種用于醫療器械的高產率膠原海綿的制備工藝。

背景技術

膠原蛋白是細胞外基質主要成分之一，約占哺乳動物蛋白總質量的1/3，是構成皮膚、韌帶、軟骨、肌腱等結締組織或器官的主要成分，膠原具有獨特的理化性質和優良的生物相容性、可降解性、低免疫性等優點，使得其在生物體內容易被吸收、親水性強、無毒安全性好，成為生物醫用材料的選擇之一，一般從富含膠原纖維的動物組織進行提取，如皮膚、肌腱、骨骼等。膠原的提取方法通常有堿法、鹽法、酸法、酶法，依照其溶解性，可將膠原分為：膠原纖維及酸溶性膠原、水溶性膠原等。

中國專利文獻CN101569765A涉及到一種保持膠原特有三螺旋結構的Ⅰ型醫用膠原材料以及提取方法，應用于組織修復方面，同時該材料具有一定的抗拉力強度，減少組織粘連，有利于組織的修復與再生。其方案如下：

前處理：牛跟腱組織經冷凍切割成0.1-3mm的薄片，在攪拌作用下將其浸泡在0.1%磷酸二氫鈉/氫氧化鈉溶液中1-3小時，保持中性條件。

酶反應：將1:5（w/w）的無花果酶加入上述溶液中充分反應，攪拌4h，之后用1%的硝酸銨反應6h，清洗。

鹽析：加入1M的氯化鈉處理并控制溫度，調節酸堿度，4℃條件下靜置過夜，取出后用2M氫氧化鈉溶液反應，后用50%硫酸中和緩沖，使溶液呈偏酸性，取出沉淀物。

清洗：將沉淀物水洗浸泡6h后去除水分，冷凍干燥的方法制得保持膠原特有三螺旋結構的Ⅰ型醫用膠原材料。

凍干成膜：將上述得到的材料溶于0.01-0.5M的冰醋酸中，得到0.5%-2%的溶液，在15000-30000rad/min、0-15℃條件下于1-8h加入0.05%-60%的氨基葡聚糖，制成復合懸浮液，經冷凍干燥后，再經物理或化學方法加強膠原分子間的鏈連接，通過低溫環氧乙烷消毒滅菌，制成孔隙在160-350μm之間具有三維孔隙結構的膜片。

然而，上述方法得到的懸浮液并不能以很好的方式將各組分分散均勻，抗拉強度低、降解速率快。

發明內容

為了解決現有技術中提取工序周期長，規模化生產占地面積大，以及可能摻入雜蛋白等問題，本發明提供了一種高產率膠原蛋白纖維的制備工藝，制備過程中并未破壞膠原結構，經過一系列條件處理，最終得到的是膠原纖維，采用膠原纖維制備的膠原海綿具有更高的抗拉強度、脹破強度和更長的降解周期。

本發明的目的是提供一種高產率膠原蛋白纖維的制備工藝。

根據本發明的具體實施方式的高產率膠原蛋白纖維的制備工藝，所述制備工藝包括以下步驟：

（1）切割：選取富含膠原的動物組織，切成片或塊，形成組織片或組織塊；

（2）前處理：將步驟（1）得到的所述組織片或組織塊浸泡在氯化鈉溶液中，氯化鈉溶液的濃度為0.5-1.5wt%，磁力攪拌進行第一次混合，然后水洗去除氯化鈉溶液；然后向浸泡后組織中加入乙醇溶液，所述乙醇溶液的濃度為60-90wt%，磁力攪拌進行第二次混合，然后水洗去除乙醇溶液，形成前處理組織；

（3）酶反應：在酸性或弱堿性溶液中，加入10-20wt%步驟（2）得到的所述前處理組織，再加入蛋白酶進行酶解，酶解完成后中止反應；然后水洗去除溶液，形成待粉碎組織；