[發(fā)明專利]一種建立乳腺類器官或/和乳腺癌類器官的培養(yǎng)基及方法和應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210017259.1
• 申請日: 2022-01-07
• 公開（公告）號: CN114317442A
• 公開（公告）日: 2022-04-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 黃璘;聶盼;萬源
• 申請（專利權(quán)）人: 重慶嘉士騰生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/09
• 分類號: C12N5/09;C12N5/071;C12Q1/02
• 代理公司: 重慶航圖知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 50247
• 代理人: 王貴君

本發(fā)明公開了一種建立乳腺類器官或/和乳腺癌類器官的培養(yǎng)基及方法和應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，所述培養(yǎng)基為含有如下組分的DMEM/F12完全培養(yǎng)基：雌二醇、氫化可的松、R?Spondin 3、Neuregulin 1、FGF7、FGF10、rh?EGF、PDGF、Noggin、A83?01、Wnt3a、Y?27632、SB202190、B27、N?乙酰半胱氨酸、煙酰胺、GlutaMax、胎牛血清、青霉素/鏈霉素雙抗，所述培養(yǎng)基用于建立乳腺類器官或/和乳腺癌類器官，可以加快乳腺或/和乳腺癌細胞的增殖與自組裝能力，加快類器官的建立以及提高類器官建立的成功率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種建立乳腺類器官或/和乳腺癌類器官的培養(yǎng)基及方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

乳腺癌是乳腺上皮細胞在多種致癌因子的作用下，發(fā)生增殖失控的現(xiàn)象。疾病早期常表現(xiàn)為乳房腫塊、乳頭溢液、腋窩淋巴結(jié)腫大等癥狀，晚期可因癌細胞發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移，出現(xiàn)多器官病變，直接威脅患者的生命。乳腺癌常被稱為“粉紅殺手”，其發(fā)病率位居女性惡性腫瘤的首位，男性乳腺癌較為少見。目前抗乳腺癌的藥物水平不均衡，有效的藥物十分昂貴且治療效果不太理想，藥物篩選水平層次不齊，缺乏一個能夠高度模擬體內(nèi)微環(huán)境的評估系統(tǒng)，類器官培養(yǎng)越來越多地用于實驗?zāi)M人類癌癥，以期定制個性化藥物和預(yù)測藥物反應(yīng)。乳腺癌也不例外，但原發(fā)性乳腺癌尤其存在一些固有的困難，活檢中經(jīng)常存在殘留的非惡性細胞，近來，類器官技術(shù)已被用于生成大量乳腺癌類器官，相較于2D的細胞培養(yǎng)，類器官的三維培養(yǎng)更能體現(xiàn)腫瘤組織在體內(nèi)的生長環(huán)境，不管在結(jié)構(gòu)、還是亞細胞種類都高度還原了腫瘤器官的原生態(tài)。

類器官是由多能干細胞或器官祖細胞分化，并自組裝成有結(jié)構(gòu)和功能的完整哺乳動物器官，類器官技術(shù)在研究廣泛的對象方面潛力巨大，包括發(fā)育生物學、疾病病理學、細胞生物學、再生機制、精準醫(yī)療以及藥物毒性和藥效試驗等。對于這些應(yīng)用以及其他應(yīng)用，類器官培養(yǎng)實現(xiàn)了對現(xiàn)有2D培養(yǎng)方法和動物模型系統(tǒng)的高信息量的互補，是二維培養(yǎng)和活體模型之間的重要橋梁，其較單層細胞培養(yǎng)模型更具生理學相關(guān)性，同時比活體模型更容易操縱監(jiān)測信號通路和基因組編輯。類器官的價值在于它們能夠自組織成最小的生物單位，表現(xiàn)出與原始組織相似的功能和復(fù)雜性。類器官的可操作性預(yù)示著類器官將為廣泛的基礎(chǔ)研究提供出色的模型系統(tǒng)，包括表達譜研究和體內(nèi)難以獲得的稀有細胞譜系的分析。

類器官在抗腫瘤藥物篩選領(lǐng)域表現(xiàn)出了巨大的潛力，藥物的篩選測試展示了藥物對類器官最直觀的表現(xiàn)，高度模擬了藥物對器官的效果。因此，亟需一種可以加快乳腺癌細胞的增殖與自組裝能力，加快類器官的建立以及提高類器官建立的成功率的培養(yǎng)方法，為乳腺癌類器官的培養(yǎng)提供了多樣性。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的目的之一在于提供一種建立乳腺類器官或/和乳腺癌類器官的培養(yǎng)基；本發(fā)明的目的之二在于基于所述培養(yǎng)基建立乳腺類器官或/和乳腺癌類器官的方法；本發(fā)明的目的之三在于提供所述培養(yǎng)基在乳腺癌類器官或/和乳腺類器官篩選抗乳腺癌藥物中的應(yīng)用。

為達到上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

1、一種建立乳腺類器官或/和乳腺癌類器官的培養(yǎng)基

所述培養(yǎng)基為含有如下組分的DMEM/F12完全培養(yǎng)基：雌二醇、氫化可的松、R-Spondin3、Neuregulin 1、FGF7、FGF10、rh-EGF、PDGF、Noggin、A83-01、Wnt3a、Y-27632、SB202190、B27、N-乙酰半胱氨酸、煙酰胺、GlutaMax、胎牛血清、青霉素/鏈霉素雙抗。