[發明專利]一種建立乳腺類器官或/和乳腺癌類器官的培養基及方法和應用

在審

• 申請號: 202210017259.1
• 申請日: 2022-01-07
• 公開（公告）號: CN114317442A
• 公開（公告）日: 2022-04-12
• 發明（設計）人: 黃璘;聶盼;萬源
• 申請（專利權）人: 重慶嘉士騰生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/09
• 分類號: C12N5/09;C12N5/071;C12Q1/02
• 代理公司: 重慶航圖知識產權代理事務所(普通合伙) 50247
• 代理人: 王貴君

1.一種建立乳腺類器官或/和乳腺癌類器官的培養基，其特征在于：所述培養基為含有如下組分的DMEM/F12完全培養基：雌二醇、氫化可的松、R-Spondin 3、Neuregulin 1、FGF7、FGF10、rh-EGF、PDGF、Noggin、A83-01、Wnt3a、Y-27632、SB202190、B27、N-乙酰半胱氨酸、煙酰胺、GlutaMax、胎牛血清、青霉素/鏈霉素雙抗。

2.根據權利要求1所述建立乳腺類器官或/和乳腺癌類器官的培養基，其特征在于，所述組分的濃度如下：雌二醇10nM-1000nM、氫化可的松0.1-100μg/ml、R-Spondin 3100-500ng/ml、Neuregulin 1 1-10nM、FGF7 1-10ng/ml、FGF10 10-100ng/ml、rh-EGF 1-10ng/ml、PDGF 1-10ng/ml、Noggin 50-500ng/ml、A83-01 100-1000nM、Wnt3a 1-5nM、Y-27632 1-10μM、SB202190 100-1000ng、B27 10ng/ml、N-乙酰半胱氨酸1-5nM、煙酰胺1-10nM、GlutaMax 1-5nM、胎牛血清體積分數10％、青霉素/鏈霉素雙抗體積分數1％。

3.基于權利要求1或2所述培養基建立乳腺類器官或/和乳腺癌類器官的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將獲得的乳腺組織或乳腺癌組織制備成單細胞懸液；

(2)將步驟(1)制備的單細胞懸液加入3D培養基質膠重懸，然后接種于培養裝置中，加入權利要求1或2所述的培養基，培養箱中擴大培養。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述乳腺組織或乳腺癌組織的來源于哺乳動物。

5.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述乳腺組織或乳腺癌組織制備成單細胞懸液具體過程是經過剪碎、研磨、過濾得到。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述剪碎后組織大小為1cm×1cm。

7.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述過濾為使用200目的濾網過濾。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(2)中，擴大培養中每三天更換一次培養基。

9.權利要求1或2任一項所述培養基在乳腺癌類器官或/和乳腺類器官篩選抗乳腺癌藥物或治療方案中的應用。

10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于：所述藥物及治療方案包含化療藥物和靶向藥物、放療。