[發明專利]一種裂解結合液、RNA提取試劑盒及RNA提取方法在審
| 申請號: | 202210017237.5 | 申請日: | 2022-01-07 |
| 公開(公告)號: | CN114317526A | 公開(公告)日: | 2022-04-12 |
| 發明(設計)人: | 龐經昊;黃明賢;任輝 | 申請(專利權)人: | 蘇州海貍生物醫學工程有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/10 | 分類號: | C12N15/10;C12Q1/6806 |
| 代理公司: | 北京集佳知識產權代理有限公司 11227 | 代理人: | 常亮 |
| 地址: | 215000 江蘇省蘇州市*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 裂解 結合 rna 提取 試劑盒 方法 | ||
1.一種裂解結合液,包括DEPC水和如下濃度的組分:
2.根據權利要求1所述的裂解結合液,其特征在于,包括DEPC水和如下濃度的組分:
3.根據權利要求1所述的裂解結合液,其特征在于,包括DEPC水和如下濃度的組分:
4.根據權利要求1~3任一項所述的裂解結合液,其特征在于,還包括0.1-1wt%十二烷基磺酸鈉和/或0.1-10wt%月桂基硫酸鈉。
5.權利要求1~4任一項所述的裂解結合液在提取血液RNA中的應用。
6.RNA提取試劑盒,包括:
權利要求1~4任一項所述的裂解結合液;和
清洗液、洗脫液和磁珠中的至少一種。
7.根據權利要求6所述的RNA提取試劑盒,其特征在于,所述清洗液包括第一清洗液和第二清洗液;
所述第一清洗液包括以下組分:
0.1-10M鹽酸胍;
0.1-10M氯化鈉;
0.01-0.5vol%吐溫-20;
10-60vol%異丙醇;
第二清洗液為80%乙醇;
所述洗脫液為DEPC水。
8.一種病毒RNA的提取方法,其特征在于,利用權利要求6或7所述的試劑盒提取待測樣本中的RNA。
9.根據權利要求8所述的提取方法,其特征在于,包括如下步驟:
1)將磁珠進行羧基改性后懸浮于緩沖液中,得到第一混合液;
3)將待測樣本中加入裂解結合液得到第二混合液;
4)第一混合液與第二混合,得到含有核酸-磁珠的第三混合液;
5)利用磁力吸附第三混合液的中核酸-磁珠,去除上清液;收集磁珠,依次用第一清洗液和第二清洗液洗滌,干燥,再加入第二清洗液洗滌;
6)將洗滌后的磁珠干燥,然后用洗脫液洗脫,收集洗脫液,獲得病毒RNA。
10.根據權利要求9所述的方法,其特征在于,所述磁珠為超順磁性二氧化硅磁珠;所述第一混合液中,超順磁性二氧化硅磁珠的濃度為10-100mg/mL。
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