[發(fā)明專利]一種豬腸膜蛋白酶解產(chǎn)物的制備方法及應(yīng)用在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202210015093.X | 申請(qǐng)日： | 2022-01-07 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN114287514A | 公開(kāi)（公告）日： | 2022-04-08 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 王在貴;黃錚煊;管賀龍;李高朋;陸靜;吳奇;崔經(jīng)緯;肖芬芬 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | A23J3/34 | 分類號(hào)： | A23J3/34;A23K50/75;A23K20/147;A23K10/37;C12N1/20;C12P21/06;C12R1/07 |
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| 地址： | 230036 安徽*** | 國(guó)省代碼： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 種豬 膜蛋白 產(chǎn)物 制備 方法 應(yīng)用 | ||
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種豬腸膜蛋白酶解產(chǎn)物的制備方法及其應(yīng)用，通過(guò)利用貝萊斯芽孢桿菌蛋白酶和胰蛋白酶聯(lián)合降解豬腸膜蛋白生成含小肽的復(fù)合產(chǎn)物，將用于生產(chǎn)豬腸衣的廢棄腸段冷凍壓碎，向得到的壓碎混合物中加入貝萊斯芽孢桿菌發(fā)酵液和胰蛋白酶溶液的混合酶液，混勻后在37℃條件下酶解腸段壓碎物2～4h，得到貝萊斯芽孢桿菌蛋白酶和胰蛋白酶聯(lián)合酶解豬腸膜蛋白產(chǎn)物，小肽含量提高5?10倍，將酶解產(chǎn)物制備成飼料添加劑添飼到種蛋雞飼料中，可以提高種蛋雞產(chǎn)蛋率、受精率、孵化率。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種豬腸衣蛋白的酶解產(chǎn)物制備方法及應(yīng)用。
背景技術(shù)
隨著社會(huì)發(fā)展，生活水平的提高，人們對(duì)于生活質(zhì)量的要求也在同步增加。雞肉類產(chǎn)品依然為國(guó)內(nèi)廣大消費(fèi)者的主要內(nèi)類食品之一。但是蛋種雞一直存在繁殖率低的瓶頸問(wèn)題，為了提高蛋種雞的繁殖率，一般通過(guò)添加微生物添加劑及激素類添加劑，但是作用效果仍有進(jìn)一步提高的空間。貝萊斯芽孢桿菌蛋白酶有其獨(dú)特的生化特性，利用該蛋白酶降解豬腸膜蛋白作為飼料添加劑促進(jìn)蛋種雞產(chǎn)蛋率、孵化率等技術(shù)與方法尚未見(jiàn)報(bào)道。為了進(jìn)一步獲得高效價(jià)的促進(jìn)蛋種雞繁殖性能添加劑，項(xiàng)目組經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的研究和試驗(yàn)獲得了本技術(shù)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于解決如何利用微生物酶聯(lián)合胰蛋白酶降解豬腸膜蛋白的酶解產(chǎn)物促進(jìn)雞生長(zhǎng)的技術(shù)，提供了一種豬腸膜蛋白復(fù)合酶解產(chǎn)物的制備方法及其應(yīng)用。
為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明公開(kāi)了一種復(fù)合酶解豬腸膜蛋白產(chǎn)物在促進(jìn)雞生長(zhǎng)與繁殖中的應(yīng)用。
所述應(yīng)用是將豬腸膜蛋白酶解產(chǎn)物添加到雞飼料中。
所述應(yīng)用是通過(guò)貝萊斯芽孢桿菌蛋白酶與胰蛋白酶聯(lián)合降解豬腸膜蛋白生成小肽，制備成飼料添加劑。
所述飼料添加劑的制備過(guò)程如下：向復(fù)合酶解液中加入3～5倍重量的礱糠粉，自然風(fēng)干2～7天，粉碎裝袋，得到飼料添加劑。
本發(fā)明還公開(kāi)了上述豬腸膜蛋白酶解產(chǎn)物的制備方法，包括以下步驟：
S1：將用于生產(chǎn)豬腸衣的廢棄腸段用液氮冷凍、壓碎、充分破碎腸壁細(xì)胞，釋放出細(xì)胞內(nèi)容物；
S2：向步驟S1得到的壓碎混合物中加入貝萊斯芽孢桿菌發(fā)酵液和胰蛋白酶溶液的混合酶液，所述的混合酶液中貝萊斯芽孢桿菌發(fā)酵液和胰蛋白酶溶液的酶活力比例為5：1，二者混合后在37℃下酶解壓碎混合物2～4h，得到豬腸膜蛋白的復(fù)合酶解產(chǎn)物。
所述貝萊斯芽孢桿菌發(fā)酵液的制備步驟如下：
S21：將貝萊斯芽孢桿菌接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，于21～53℃下發(fā)酵培養(yǎng)48～72h，發(fā)酵培養(yǎng)基的起始pH值為7.0；
S22：將步驟S21中得到的發(fā)酵液在4℃、4000rpm條件下離心20min，取上清液，即得貝萊斯芽孢桿菌發(fā)酵液。
所述步驟S21中的發(fā)酵培養(yǎng)基是由碳源、氮源和金屬離子配制而成的水溶液，所述碳源和氮源總質(zhì)量與水的比例為1g：50mL，所述碳源、氮源的質(zhì)量比為2：3，所述金屬離子加入量與水的比例為1g：100mL。
所述碳源為葡萄糖、蔗糖、淀粉的組合物，質(zhì)量比為2.5：3：3.8，所述氮源為黃豆粉、玉米粉、蛋白胨、牛肉膏的組合物，質(zhì)量比3：0.5：1.25：0.75，所述金屬離子為Ca2+、Mg2+、K+、Cu2+，摩爾比為2：1：1：0.75。
所述步驟S2中加入混合酶液時(shí)液料比為1：1。
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