[發明專利]一種馬來酸順反異構酶突變體有效
| 申請號： | 202210006581.4 | 申請日： | 2022-01-05 |
| 公開（公告）號： | CN114317510B | 公開（公告）日： | 2023-07-04 |
| 發明（設計）人： | 周哲敏;劉中美;王暢;王相玉;周麗;崔文璟;郭軍玲 | 申請（專利權）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12N9/90 | 分類號： | C12N9/90;C12N15/61;C12P13/20;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 馬來 順反異構 突變體 | ||
【權利要求書】：
1.?一種馬來酸順反異構酶突變體，其特征在于，以氨基酸序列如SEQ?ID?NO.4所示的序列為親本序列，將第96位的谷氨酰胺取代谷氨酸，將第100的丙氨酸取代為甲硫氨酸。
2.編碼權利要求1所述的馬來酸順反異構酶突變體的基因。
3.含有權利要求2所述基因的載體。
4.表達權利要求1所述馬來酸順反異構酶突變體或含有權利要求2所述基因的微生物細胞。
5.根據權利要求4所述的微生物細胞，其特征在于，以大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、畢赤酵母為宿主細胞。
6.一種生產天冬氨酸的方法，其特征在于，利用表達權利要求1所述來酸順反異構酶突變體以及天冬氨酸酶AspA的微生物細胞轉化馬來酸生成L-天冬氨酸。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，將所述微生物細胞在培養體系中培養至OD600為0.6~0.8，加入誘導劑誘導14~16h，收集菌體；將菌體添加至以馬來酸為底物的反應體系中反應4~12h。
8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述反應體系中底物濃度為3.0~4.0M，菌株OD600=5±0.5，在pH8±1、37~45℃下反應。
9.權利要求1所述來酸順反異構酶突變體，或權利要求4或5所述微生物細胞在生產L-天冬氨酸產品中的應用。
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