[發(fā)明專利]在染色質(zhì)靶點(diǎn)處DNA鏈斷裂的誘導(dǎo)

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202180008284.7
• 申請(qǐng)日: 2021-01-15
• 公開（公告）號(hào): CN114981424A
• 公開（公告）日: 2022-08-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 邁克爾·羅德尼·羅恩特里;詹姆斯·M·斯塔福德
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 尼祖姆貝公司
• 主分類號(hào): C12N9/22
• 分類號(hào): C12N9/22;C07K19/00;A61P35/00
• 代理公司: 上海瀚橋?qū)＠硎聞?wù)所(普通合伙) 31261
• 代理人: 曹芳玲

1.一種物質(zhì)組合物，包括：

編碼肽的核苷酸構(gòu)建體，所述肽至少包括：

被配置為與具有降低的表觀遺傳抑制模式的染色質(zhì)結(jié)合的靶向結(jié)構(gòu)域；以及

DNA 鏈斷裂誘導(dǎo)結(jié)構(gòu)域。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的物質(zhì)組合物，其特征在于，所述靶向結(jié)構(gòu)域被配置為與和DNA甲基化不相關(guān)的組蛋白部分結(jié)合。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的物質(zhì)組合物，其特征在于，所述靶向結(jié)構(gòu)域?yàn)榧谆舾蠨NA結(jié)合結(jié)構(gòu)域，被配置為與重復(fù)元件相關(guān)的第一DNA序列結(jié)合，所述DNA序列具有癌癥特異性低甲基化模式。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的物質(zhì)組合物，其特征在于，所述與重復(fù)元件相關(guān)的第一DNA序列為長(zhǎng)散布核元件(LINE)序列。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的物質(zhì)組合物，其特征在于，所述核苷酸構(gòu)建體進(jìn)一步編碼第二肽，所述第二肽包括：

被配置為與重復(fù)元件相關(guān)的第二DNA序列結(jié)合的第二靶向域，所述第二DNA序列位于相對(duì)鏈上第一DNA 序列的閾值距離內(nèi)；以及

DNA 鏈斷裂誘導(dǎo)結(jié)構(gòu)域。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的物質(zhì)組合物，其特征在于，所述DNA鏈斷裂誘導(dǎo)結(jié)構(gòu)域包括核酸酶結(jié)構(gòu)域。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的物質(zhì)組合物，其特征在于，所述核酸酶結(jié)構(gòu)域包括FokI核酸酶結(jié)構(gòu)域。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的物質(zhì)組合物，其特征在于，所述DNA鏈斷裂誘導(dǎo)結(jié)構(gòu)域包括甲基化敏感核酸酶結(jié)構(gòu)域。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的物質(zhì)組合物，其特征在于，所述核苷酸構(gòu)建體是mRNA構(gòu)建體。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的物質(zhì)組合物，其特征在于，所述核苷酸構(gòu)建體是DNA構(gòu)建體。

11.一種治療具有降低的表觀遺傳抑制的哺乳動(dòng)物細(xì)胞的方法，其特征在于，包括：

產(chǎn)生包括靶向結(jié)構(gòu)域的肽，所述靶向結(jié)構(gòu)域被配置為結(jié)合具有與DNA鏈斷裂誘導(dǎo)結(jié)構(gòu)域偶聯(lián)的降低的表觀遺傳抑制模式；

將治療劑量的所產(chǎn)生的肽導(dǎo)向細(xì)胞核；

通過將靶向結(jié)構(gòu)域與細(xì)胞核的染色質(zhì)結(jié)合，使 DNA 鏈斷裂誘導(dǎo)結(jié)構(gòu)域靠近所述細(xì)胞核的 DNA，從而在所述細(xì)胞核的 DNA 中產(chǎn)生雙鏈斷裂；以及

通過在細(xì)胞核 DNA 中累積閾值數(shù)量的雙鏈斷裂來觸發(fā)細(xì)胞凋亡。

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其特征在于，還包括：

提供編碼所述肽的核苷酸構(gòu)建體；以及

誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)肽的產(chǎn)生。

13.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其特征在于，將治療劑量的所產(chǎn)生的肽導(dǎo)向細(xì)胞核包括將肽包裝在組合物中，所述組合物包括一種或多種靶向細(xì)胞核的細(xì)胞表面受體的結(jié)合劑。

14.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其特征在于，所述靶向結(jié)構(gòu)域被配置為與DNA甲基化不相關(guān)的組蛋白部分結(jié)合。

15.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其特征在于，所述靶向結(jié)構(gòu)域?yàn)榧谆舾蠨NA結(jié)合結(jié)構(gòu)域，被配置為與重復(fù)元件相關(guān)并具有癌癥特異性低甲基化模式的第一DNA序列結(jié)合。

16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其特征在于，還包括：

產(chǎn)生第二肽，所述第二肽包括與第二靶向結(jié)構(gòu)域偶聯(lián)的第二DNA鏈斷裂誘導(dǎo)結(jié)構(gòu)域，所述第二靶向結(jié)構(gòu)域被配置為與重復(fù)元件相關(guān)的第二DNA序列結(jié)合，所述第二DNA序列位于相對(duì)鏈上第一DNA序列的閾值距離內(nèi)；以及

將治療劑量的第二種產(chǎn)生的肽導(dǎo)向細(xì)胞核。