[發明專利]一種基于乙烯基锍鹽的生物大分子修飾方法

有效

• 申請號: 202111661772.6
• 申請日: 2021-12-31
• 公開（公告）號: CN114349822B
• 公開（公告）日: 2023-10-20
• 發明（設計）人: 李子剛;尹豐;徐紅坤;孔凌微
• 申請（專利權）人: 深圳灣實驗室坪山生物醫藥研發轉化中心;北京大學深圳研究生院;深圳灣實驗室
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/113;C07K1/02;C07K1/04
• 代理公司: 上海驍象知識產權代理有限公司 31315
• 代理人: 林煒

1.一種基于乙烯基锍鹽的生物大分子修飾方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)將多肽衍生為乙烯基锍鹽多肽：用固相合成法將多肽接在樹脂上，生成乙烯基锍鹽多肽樹脂后，將乙烯基锍鹽多肽從樹脂上剪切下來；

(2)將步驟(1)所得的乙烯基锍鹽多肽與生物大分子反應，反應溫度為25℃-37℃，pH值范圍為7-9，反應溶劑為水、乙腈、甲醇、乙醇、異丙醇、叔丁醇、乙二醇、甘油、二甲基亞砜、N,N-二甲基甲酰胺或PBS溶液中的一種或幾種，反應時間為2-6小時；

其中，所述多肽含有甲硫氨酸基團，所述生物大分子為帶有巰基的多肽、蛋白質或核酸中的一種或幾種。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(2)中，反應溫度為37℃，pH值為7.4，反應溶劑為PBS溶液，反應時間為4小時。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中生成乙烯基锍鹽多肽樹脂的具體步驟為：在甲酸存在下，用二氯甲烷與乙腈的混合體系做溶劑，將接有多肽的樹脂浸在溶劑中，加入三氟甲磺酸2-溴-乙酯，反應6小時，洗干凈樹脂，用N,N-二甲基甲酰胺與二氯甲烷的混合體系作溶劑，樹脂浸在溶劑中反應即得乙烯基锍鹽多肽樹脂。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟(1)中的乙烯基锍鹽多肽為PDM1、PDM2或PDM3中的一種或幾種。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟(2)中乙烯基锍鹽多肽為PDM2，生物大分子為蛋白，所述PDM2與蛋白的摩爾比為5。