日韩在线一区二区三区,日本午夜一区二区三区,国产伦精品一区二区三区四区视频,欧美日韩在线观看视频一区二区三区 ,一区二区视频在线,国产精品18久久久久久首页狼,日本天堂在线观看视频,综合av一区

[發明專利]腸道類器官定向分化潘氏細胞的方法在審

專利信息
申請號: 202111654672.0 申請日: 2021-12-30
公開(公告)號: CN114480274A 公開(公告)日: 2022-05-13
發明(設計)人: 康樂;方雪;吳佳藝;宋銥航;賀子軒 申請(專利權)人: 中國人民解放軍海軍軍醫大學第一附屬醫院
主分類號: C12N5/078 分類號: C12N5/078;C12N5/071
代理公司: 上海和華啟核知識產權代理有限公司 31339 代理人: 王仙子
地址: 200433 *** 國省代碼: 上海;31
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 腸道 器官 定向 分化 細胞 方法
【說明書】:

發明提供一種腸道類器官定向分化潘氏細胞的方法,包括如下步驟:獲取腸道類器官;將所述腸道類器官置入類器官培養基中;于所述類器官培養中加入DAPT和CHIR99021,對所述類器官培養基中的所述腸道類器官刺激預設時間。本發明的腸道類器官定向分化潘氏細胞的方法,通過在所述類培養基中加入DAPT和CHIR99021,可以在短時間內獲取大量的、高純度的潘氏細胞。

技術領域

本發明涉及動物類器官培養領域,特別是涉及一種腸道類器官定向分化潘氏細胞的方法。

背景技術

潘氏細胞是位于小腸及近端結腸隱窩基底部獨特的上皮細胞,雖然數量較少,但通過其分泌防御素、溶菌酶等為機體抵抗病原微生物,調節宿主免疫功能起到重要作用。此外,亦有研究證實潘氏細胞還有其他重要的功能,例如,潘氏細胞為Lgr5陽性干細胞提供必須的生境信號、潘氏細胞與腸道腫瘤的發生發展密切相關等。關于潘氏細胞的功能還有許多尚未探索的領域,所以,亟待找尋一種方法可以在體外獲得大量潘氏細胞進行相關的研究。

類器官技術,成為近年來生物、醫學界最熱門的前沿技術之一。腸道類器官是一種三維的腸道細胞培養系統,能夠在實驗室中利用人或動物的腸道干細胞增殖、分化為器官特異性細胞集合,并且以與體內相近的方式,經細胞分序及空間限制性系統進行分化,從而完成自我更新、自我組建。現主要應用于疾病模型的建立、藥物的篩選及檢測以及再生醫學方面的研究。然而,類器官培養技術也存在其局限性,由于體外培養的腸道類器官分化不可控性,使得類器官中混雜有分化為各種類型的腸道細胞,這成為了定向獲取大量的潘氏細胞的技術難題。

發明內容

為實現上述目的及其他相關目的,本發明提供一種腸道類器官定向分化潘氏細胞的方法,包括如下步驟:獲取腸道類器官;將所述腸道類器官置入類器官培養基中;于所述類器官培養中加入DAPT和CHIR99021,對所述類器官培養基中的所述腸道類器官刺激預設時間。

可選地,所述預設時間為5~10天。

可選地,所述獲取腸道類器包括如下步驟:

取小腸,用冷PBS沖洗腸管若干次,去除腸內容物;

將所述腸管縱行切開,在剪成預定長度的腸段;

將所述腸段移入裝有PBS的試管中;

晃動所述試管清洗,析出第一上清液,并去除第一上清液;

重復上一步驟若干次,直到所述第一上清液清亮;

棄掉最后得到的所述第一上清液;

向所述試管中加入隱窩分離液輕搖,以析出第二上清液;

去除所述第二上清液;

向所述試管中加入PBS,晃動試管,以析出第三上清液,觀察是否有腸道單元,并收集所述第三上清液;

重復上述步驟,直至收集到預設容積的所述第三上清液;

將所述第三上清液進行離心處理,以得到腸道細胞;

使用洗滌液重懸所述腸道細胞,并對重懸后的所述腸道細胞進行離心處理,以得到所述腸道類器官;

重復上一步驟。

可選地,用所述冷PBS沖洗所述腸管的次數為3~4次;所述預定長度為0.2cm~0.6cm;向所述試管中加入隱窩分離液之后,于3℃~6℃下輕搖15min~35min;所述預設容積為40ml~60ml。

可選地,將所述第三上清液進行離心處理的過程中,離心機的轉速為300×g,離心處理的時間為3min~7min,離心處理的溫度為2℃~6℃;對重懸后的所述腸道細胞進行離心處理的過程中,離心機的轉速為300×g,離心處理的時間為3min~7min,離心處理的溫度為2℃~6℃。

下載完整專利技術內容需要扣除積分,VIP會員可以免費下載。

該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息,商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于中國人民解放軍海軍軍醫大學第一附屬醫院,未經中國人民解放軍海軍軍醫大學第一附屬醫院許可,擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作,請聯系【客服

本文鏈接:http://www.szxzyx.cn/pat/books/202111654672.0/2.html,轉載請聲明來源鉆瓜專利網。

×

專利文獻下載

說明:

1、專利原文基于中國國家知識產權局專利說明書;

2、支持發明專利 、實用新型專利、外觀設計專利(升級中);

3、專利數據每周兩次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、內容包括專利技術的結構示意圖流程工藝圖技術構造圖

5、已全新升級為極速版,下載速度顯著提升!歡迎使用!

請您登陸后,進行下載,點擊【登陸】 【注冊】

關于我們 尋求報道 投稿須知 廣告合作 版權聲明 網站地圖 友情鏈接 企業標識 聯系我們

鉆瓜專利網在線咨詢

周一至周五 9:00-18:00

咨詢在線客服咨詢在線客服
tel code back_top
主站蜘蛛池模板: 国产一区亚洲一区| 亚洲少妇中文字幕| 国产美女三级无套内谢| 97人人模人人爽人人喊38tv| 免费超级乱淫视频播放| 欧美激情视频一区二区三区免费| 国产在线干| 狠狠躁日日躁狂躁夜夜躁av| 日韩精品少妇一区二区在线看| 国产大片一区二区三区| 日本三级香港三级| 97人人模人人爽视频一区二区| 国内精品久久久久久久星辰影视| 亚洲欧美另类久久久精品2019| 自拍偷在线精品自拍偷无码专区| 精品国产区一区二| 国产精品二十区| 国产精品不卡一区二区三区| 狠狠色噜噜狠狠狠狠777| 91一区在线观看| 99国产超薄丝袜足j在线观看| 日本精品一二三区| 日韩精品一二区| 99国产伦精品一区二区三区 | 片毛片免费看| 国产一区二区播放| 久久五月精品| 日日夜夜精品免费看| 538在线一区二区精品国产| 国产一区=区| 亚洲欧美国产精品一区二区| 欧美精品久| 99精品视频一区| 日韩精品一区二区中文字幕| 欧美日韩激情在线| 久久人人爽爽| 国产一区精品在线观看| 午夜电影一区二区三区| 四虎国产精品永久在线| 99欧美精品| 国产精品69av| 国产精品色婷婷99久久精品| 国久久久久久| 一区二区三区国产精品视频| 一区二区三区日韩精品| 99国产精品| 91久久国产露脸精品国产| 国产区精品| 精品国产一区在线| 国产日产高清欧美一区二区三区| 欧美乱大交xxxxx胶衣| 日本一码二码三码视频| 亚洲欧美国产精品va在线观看| 国产综合久久精品| 一区二区免费播放| 综合欧美一区二区三区| 国产一级一区二区三区| 亚洲精品suv精品一区二区| 国产精品视频二区不卡| 免费看性生活片| 香蕉视频在线观看一区二区| 精品99免费视频| 999久久国精品免费观看网站| 国产欧美三区| 国产精品18久久久久白浆| 91精品国产九九九久久久亚洲 | 激情欧美日韩| 日本看片一区二区三区高清| 91麻豆精品国产91久久| 国产日韩欧美另类| 欧美高清视频一区二区三区| 欧美日韩精品在线播放| 日韩精品中文字| 天天干狠狠插| 久久国产精彩视频| 欧美日韩精品中文字幕| 亚洲欧美日韩国产综合精品二区| 在线精品国产一区二区三区| 亚洲二区在线播放视频| 亚洲少妇一区二区三区| 欧美日本三级少妇三级久久| 国产精品视频一区二区二| 午夜天堂电影| 国产精品国精产品一二三区| 午夜精品影视| 午夜激情电影在线播放| 激情久久一区| 国产大学生呻吟对白精彩在线| 国产欧美一区二区三区免费视频| 午夜wwww| 91影视一区二区三区| 97久久精品一区二区三区观看| 91精品视频一区二区三区| 91麻豆精品国产91久久久久推荐资源 | 国产精品精品国内自产拍下载| 国产欧美日韩一区二区三区四区| 91麻豆精品一区二区三区| 亚洲国产精品麻豆| 国产精品一级片在线观看| 国产偷窥片| 狠狠色依依成人婷婷九月| 欧美日韩三区| 国产精品免费一视频区二区三区| 精品视频在线一区二区三区| 日韩精品乱码久久久久久| 国产精品视频久久久久| 国产精品99久久久久久宅男| 精品国产乱码一区二区三区在线 | 久久亚洲精品国产日韩高潮| 日本精品三区| 午夜666| 午夜伦全在线观看| 久久中文一区| 国产精品天堂| 精品国产一区二区三区四区vr| 一区二区三区欧美视频| 一本色道久久综合亚洲精品图片| 国产精品久久亚洲7777| 最新国产精品久久精品| 国产91在| 国产剧情在线观看一区二区| 国产二区视频在线播放| 欧美日韩一卡二卡| 久久99精品国产麻豆婷婷洗澡| 日韩午夜三级| 国产偷国产偷亚洲清高| 性国产日韩欧美一区二区在线| 国产一区不卡视频| 国产精品乱码久久久久久久久| 欧美日韩一区二区三区四区五区六区| 国产二区不卡| 精品无人国产偷自产在线| 夜夜躁狠狠躁日日躁2024| 国产主播啪啪| 国产精品日韩在线观看| 精品国产乱码久久久久久图片| 肥大bbwbbwbbw高潮| 亚洲欧美日韩精品suv| 久久久国产精品一区| 国产精品色在线网站| 中文在线一区二区三区| 国产欧美视频一区二区| 国产精品视频1区2区3区| 欧美日韩亚洲国产一区| 色婷婷噜噜久久国产精品12p| 日韩av免费网站| 欧美在线免费观看一区| 亚洲欧美日本一区二区三区| 午夜精品一区二区三区三上悠亚| 午夜大片网| 一区二区三区欧美在线| 日韩av片无码一区二区不卡电影| 浪潮av色| 8x8x国产一区二区三区精品推荐| 国产精品麻豆自拍| 国产一区二区激情| 99久久精品国产系列| 96国产精品| 日本一区二区免费电影| 国产精品99在线播放| 午夜一级电影| 欧美老肥婆性猛交视频| 欧美精选一区二区三区| 国产精品9区| 国产精品一区二区6| 日本一区二区三区中文字幕| 美女直播一区二区三区| 国产日产精品一区二区三区| 久久久精品观看| 精品久久久久久久免费看女人毛片| 狠狠插影院| 91av中文字幕| 色偷偷一区二区三区| 午夜看片在线| 欧美精品中文字幕亚洲专区| 男女午夜爽爽| 欧美日韩乱码| 日韩精品久久久久久中文字幕8| 国产精品一二二区| 欧美一区二区三区激情视频| 91精品一区在线观看| 国产资源一区二区三区| 亚洲自拍偷拍中文字幕| 午夜wwwww| 日韩中文字幕在线一区二区| 精品国产乱码一区二区三区在线| 91亚洲欧美日韩精品久久奇米色| 日韩av片无码一区二区不卡电影| 国产丝袜在线精品丝袜91| 狠狠色噜噜狠狠狠狠88| 久久人做人爽一区二区三区小说| 欧美精品日韩| 亚洲一二三四区| 午夜情所理论片| 欧美3p激情一区二区三区猛视频| 久久青草欧美一区二区三区| 亚洲欧美制服丝腿| 国产精品久久久久久av免费看| 久久99精品国产| 久久九九国产精品| 久久99国产精品视频| 97人人模人人爽人人喊0| 国产精品v欧美精品v日韩| 久久99精品国产一区二区三区| 午夜叫声理论片人人影院| 李采潭无删减版大尺度| 久久精品国产亚| 国产91视频一区| 欧美一区二三区人人喊爽| 国产伦精品一区二区三区照片91 | 国产全肉乱妇杂乱视频在线观看 | 国产色99| 国产精品麻豆一区二区三区| 午夜肉伦伦影院九七影网| 国产午夜三级一二三区| 久久精品国产综合| 国产乱码精品一区二区三区中文| 久久网站精品| 久久久久国产精品嫩草影院| 久久亚洲综合国产精品99麻豆的功能介绍| 国产一级不卡视频| 久久一区二区三区视频| 亚洲国产精品91| 日韩精品中文字幕一区二区三区| 亚洲精品一区中文字幕| 国产一二区精品| 国产伦精品一区二区三区电影| 亚洲久色影视| 国产一区免费在线| 日本精品一区在线| 色噜噜狠狠狠狠色综合久| 日韩精品一区在线观看| av午夜剧场| 91亚洲国产在人线播放午夜| 丝袜诱惑一区二区三区| 狠狠躁狠狠躁视频专区| 国产欧美日韩综合精品一| 国产999久久久| 国产乱一乱二乱三| 国产69精品久久99不卡免费版| 久久久久久久久亚洲精品一牛| 91精品视频在线免费观看| aaaaa国产欧美一区二区 | 中文字幕在线一二三区| 国产精品9区| 日韩av在线播放网址|