[發明專利]一種用于臭鱖魚發酵的清酒乳桿菌直投式發酵劑及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202111651424.0
• 申請日: 2021-12-30
• 公開（公告）號: CN114317352A
• 公開（公告）日: 2022-04-12
• 發明（設計）人: 周迎芹;殷俊峰;鄢嫣;張福生;黃晶晶;謝寧寧
• 申請（專利權）人: 安徽省農業科學院農產品加工研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/04;C12P21/06;A23L17/00;C12R1/225
• 代理公司: 蘇州翔遠專利代理事務所(普通合伙) 32251
• 代理人: 王華

1.一種用于臭鱖魚發酵的清酒乳桿菌直投式發酵劑，其特征在于：由清酒乳桿菌SMF-L5菌體和體積凍干保護劑溶液混合后凍干制得；制得的凍干菌粉中清酒乳桿菌SMF-L5總數達到10¹⁰～10¹¹ cuf/g。

2.一種制備權利要求1所述的用于臭鱖魚發酵的清酒乳桿菌直投式發酵劑的方法，其特征在于：包括下列步驟：

步驟1：將清酒乳桿菌SMF-L5劃線接種于MRS固體培養基上，將固體平板置于真空包裝袋內，進行真空封口，然后倒置于恒溫培養箱中，于28-32℃條件下進行培養20-26h；從固體平板上挑取單菌落，接種于含4-6mL的MRS液體培養基中，于28-32℃條件下進行活化培養20-26h；將活化培養后的菌液以無菌的MRS液體培養基進行稀釋，調整至菌體數量達0.6-1.2×10⁸cfu/mL；然后按1.5-2.5%的接種量接種于MRS液體培養基中，于28-32℃條件下進行擴大培養20-26h；

步驟2：將步驟1得到的菌液裝入滅菌的離心管中，以7000-9000rpm/min離心10-20min，收集并合并菌體，用無菌生理鹽水將菌體重新懸浮，以7000-9000rpm/min離心10-20min離心洗滌，收集得到菌體；

步驟3：向步驟2得到的菌體中加入其體積0.5-1.5倍的凍干保護劑溶液混勻后，置于-70~-80℃的環境中預冷凍3-5h，然后轉入真空冷凍干燥機內，在-50~-60℃的條件下冷凍干燥45-50h。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：所述凍干保護劑溶液由以下質量分數的原料混合后構成：16%的脫脂乳粉、12%的海藻糖、4%的甘油和68%的水。

4.一種權利要求1所述的用于臭鱖魚發酵的清酒乳桿菌直投式發酵劑的應用，其特征在于：包括下列步驟：

步驟1：將新鮮鱖魚去魚體表面魚鱗，再經剖腹宰殺，去除內臟和魚鰓，清洗干凈后瀝水待用；

步驟2：步驟1得到的魚平整碼放于發酵容器內，每碼一層，撒上炒制花椒，碼放結束后在上層魚體上放置按壓板；

步驟3：向所述發酵容器內加入食鹽溶液，以浸沒按壓板，按壓板上放置重物用以將魚體全部浸壓于食鹽溶液液面以下，按每1kg魚添加1-3g權利要求1所述的用于臭鱖魚發酵的清酒乳桿菌直投式發酵劑投放所述發酵容器內；

步驟4：合上發酵容器的頂蓋，以厭氧發酵方式，于7-9℃條件下發酵14-18d。

5.根據權利要求4所述的用于臭鱖魚發酵的清酒乳桿菌直投式發酵劑的應用，其特征在于：所述食鹽溶液的質量分數為7-9%。