[發明專利]電子煙中18種真菌毒素的檢測方法

在審

• 申請號: 202111640136.5
• 申請日: 2021-12-29
• 公開（公告）號: CN114324656A
• 公開（公告）日: 2022-04-12
• 發明（設計）人: 張大偉;王亞紅;任瑩
• 申請（專利權）人: 羅瑪實驗室檢測服務（無錫）有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72
• 代理公司: 無錫市匯誠永信專利代理事務所(普通合伙) 32260
• 代理人: 郭慧

1.電子煙中18種真菌毒素的檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1，將煙油樣品加入乙腈溶液中，放入超聲提取裝置進行超聲提取，取下層清夜，即獲得提取液；

S2，向步驟S1中的提取液中加入乙酸進行酸化處理，獲得混合樣品，所述混合樣品中加入凈化柱并進行渦旋處理，獲得含樣凈化柱；

S3，對步驟S2中的含樣凈化柱進行離心處理，獲得預處理液；

S4，向步驟S3中的預處理液中加入正離子內標和負離子內標，渦旋處理后進行離心處理，獲得樣品凈化液；

S5，步驟S4中的樣品凈化液上樣，采用HPLC-MS/MS對黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2、伏馬菌素B1、B2、B3、蛇形毒素、HT-2毒素、新茄病鐮刀菌烯醇、T-2毒素、15-乙酰基嘔吐毒素、赭曲霉毒素A、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、雪腐鐮刀菌烯醇、3-乙酰基嘔吐毒素、瓜萎鐮刀菌素、玉米赤霉烯酮進行定性定量分析。

2.根據權利要求1所述的電子煙中18種真菌毒素的檢測方法，其特征在于，步驟S1中，所述乙腈溶液的濃度為50％，所述煙油樣品與所述乙腈溶液體積比為1:4；所述超聲提取的時間為30min。

3.根據權利要求1所述的電子煙中18種真菌毒素的檢測方法，其特征在于，步驟S2中，所述提取液與所述乙酸的體積比為20:1，所述混合樣品中加入凈化柱中的體積為750μl。

4.根據權利要求1所述的電子煙中18種真菌毒素的檢測方法，其特征在于，步驟S3中，離心時間為3min，離心轉速為10000rpm。

5.根據權利要求1所述的電子煙中18種真菌毒素的檢測方法，其特征在于，步驟S4中，所述正離子內標為含0.5％乙酸的2mM乙酸銨溶液和乙腈按體積比9:1混合的混合液分別溶解黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2、伏馬菌素B1、B2、B3、蛇形毒素、HT-2毒素、新茄病鐮刀菌烯醇、T-2毒素、15-乙酰基嘔吐毒素、赭曲霉毒素A，所述負離子內標為含0.5％乙酸的2mM乙酸銨溶液和乙腈按體積比9:1混合的混合液分別溶解脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、雪腐鐮刀菌烯醇、3-乙酰基嘔吐毒素、瓜萎鐮刀菌素、玉米赤霉烯酮。

6.根據權利要求1所述的電子煙中18種真菌毒素的檢測方法，其特征在于，步驟S5中，所述高效液相的固定相是C18色譜柱，流動相A是含0.5％乙酸的2mM乙酸銨水溶液，流動相B是含0.5％乙酸的2mM乙酸銨甲醇溶液，采用梯度洗脫，流速為1.0ml/min，柱溫為40℃，所述質譜采用正負離子兩種模式，電噴霧電離離子源，掃描方式為多反應離子監測模式，正離子模式下，檢測黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2、伏馬菌素B1、B2、B3、蛇形毒素、HT-2毒素、新茄鐮孢菌醇(NEO)、T-2毒素、15-乙酰基嘔吐毒素、赭曲霉毒素A；負離子模式下，檢測脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、3-乙酰基嘔吐毒素、雪腐鐮刀菌烯醇、瓜萎鐮菌醇、玉米赤霉烯酮。

7.根據權利要求6所述的電子煙中18種真菌毒素的檢測方法，其特征在于，所述質譜的離子源溫度：正離子模式：650℃，負離子模式：600℃；氣簾氣為35.0psi；碰撞氣為中等；離子噴霧電壓為正離子模式:5000.0V，負離子模式:-4500.0V；霧化氣為60.0psi，輔助加熱氣為65psi。