[發明專利]一種樣本釋放劑及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202111640131.2
• 申請日: 2021-12-29
• 公開（公告）號: CN115197937A
• 公開（公告）日: 2022-10-18
• 發明（設計）人: 李宗洋;戚業民;李云莉;王光宇
• 申請（專利權）人: 北京邁佳致和科技有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10;C12Q1/6806
• 代理公司: 北京知元同創知識產權代理事務所(普通合伙) 11535
• 代理人: 鄒智弘

1.一種樣本釋放劑，以樣本釋放劑的總體積計，包括：濃度為0.01-10％(w/v)的表面活性劑、濃度為0-5M的輔助鹽、濃度為0.01-500mM的pH調節劑、濃度為0.01-20％(w/v)的促進劑、濃度為0.01-5M的穩定劑和濃度為0.01-3％(w/v)的抑菌劑。

2.根據權利要求1所述的樣本釋放劑，其特征在于，所述表面活性劑選自莎梵婷、四丁基氟化銨、四丁基溴化銨、四丁基氯化銨、皂角粉、Morwet EFW(烷基萘磺酸鹽)、十二烷基肌氨酸鈉(N-月桂酰肌氨酸鈉)、十二烷基硫酸鈉、十二烷基磺酸鈉、十二烷基醇醚磷酸酯鉀、椰油酰胺丙基甜菜堿、月桂酰胺丙基甜菜堿、十六烷基三甲基溴化銨、吐溫-20、吐溫-40、吐溫-60、吐溫-80、Brij-58、曲拉通X-100中的至少一種；優選為十二烷基肌氨酸鈉、莎梵婷、月桂酰胺丙基甜菜堿中的至少一種；

優選地，所述樣本釋放劑中表面活性劑的濃度為0.01-10％(w/v)，例如濃度為0.01-8％(w/v)、0.05-5％(w/v)、0.1-2.5％(w/v)。

3.根據權利要求1或2所述的樣本釋放劑，其特征在于，所述輔助鹽選自鈉鹽或鉀鹽，優選選自氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、硫酸鎂、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鉀、碳酸氫鉀、磷酸鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、檸檬酸鈉、氟化鈉、氟化氫鉀、氟化銫、氯化鈉、氯化鉀和溴化鈉等中的至少一種；優選地，所述輔助鹽選自碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鉀、碳酸氫鉀、磷酸鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、檸檬酸鈉、氟化鈉、氯化鈉或溴化鈉；更優選為氯化鈉、碳酸氫鈉、氯化鉀中的至少一種；

優選地，所述樣本釋放劑中輔助鹽的濃度為0-5M，例如濃度為30-200mM，2-4M。

4.根據權利要求1-3任一項所述的樣本釋放劑，其特征在于，所述pH調節劑選自三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽(Tris-HCl)、嗎啉乙酸鈉、乙酸鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鉀、碳酸氫鉀、磷酸鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、檸檬酸鈉、氫氧化鈉中的至少一種；優選為三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽、乙酸鈉、檸檬酸鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉中的至少一種；

優選地，所述樣本釋放劑中pH調節劑的濃度為0.01-500mM，例如濃度為10-200mM。

5.根據權利要求1-4任一項所述的樣本釋放劑，其特征在于，所述促進劑選自二甲基亞砜、甲酰胺、N,N-二甲基甲酰胺、冠醚(如：18-冠-6)、甘露醇、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙二醇8000、聚乙二醇10000、十四醇、十六醇、十八醇、聚乙烯吡咯烷酮(K＝10-20)、糖原、線性聚丙烯酰胺、N-正烷基苯丙異噻酮唑酮中的至少一種；優選為二甲基亞砜、聚乙二醇8000、甲酰胺、十六醇中的至少一種；

優選地，所述樣本釋放劑中促進劑的濃度為0.01-20％(w/v)，例如濃度為1-10％(w/v)。

6.根據權利要求1-5任一項所述的樣本釋放劑，其特征在于，所述穩定劑選自異硫氰酸胍、鹽酸胍、尿素、明膠、蔗糖脂肪酸酯、輕質白油中的至少一種；優選為異硫氰酸胍、輕質白油中的至少一種；

優選地，所述樣本釋放劑中穩定劑的濃度為0.01-5M，例如濃度為10-20mM、0.5-4M。

7.根據權利要求1-6任一項所述的樣本釋放劑，其特征在于，所述抑菌劑選自疊氮化鈉、山梨醇、山梨酸鉀、苯氧乙醇、多菌清、百菌靈中的至少一種；優選為疊氮化鈉、山梨酸鉀、苯氧乙醇、多菌清中的至少一種；

優選地，所述樣本釋放劑中抑菌劑的濃度為0.01-3％(w/v)，例如濃度為0.1-1％(w/v)。

8.權利要求1-7任一項所述樣本釋放劑的制備方法，包括將表面活性劑、輔助鹽、pH調節劑、促進劑、穩定劑和抑菌劑進行混合的步驟。

9.權利要求1-7任一項所述樣本釋放劑在核酸釋放中的應用。

10.一種核酸釋放方法，包括以下步驟：將樣本加入到權利要求1-7任一項所述樣本釋放劑中，然后振蕩混勻，室溫放置，吸取上清即可獲得釋放的核酸；

優選地，所述樣本為細菌、上皮細胞、血細胞或病毒。