[發明專利]重組抗體及其應用

在審

• 申請號: 202111602287.1
• 申請日: 2021-12-24
• 公開（公告）號: CN115417930A
• 公開（公告）日: 2022-12-02
• 發明（設計）人: 田志剛;曹國帥;肖衛華;孫汭;孫昊昱
• 申請（專利權）人: 合肥天港免疫藥物有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;G01N33/574;G01N33/68;A61K39/395;A61P35/00;A23L33/10;A23L33/13
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 黃德海

本發明提出了一種重組抗體及其應用，該重組抗體為雙鏈抗體，包括：第一條肽鏈，包括CD16單鏈抗體、IL?21分子和第一Fc區，所述CD16單鏈抗體包括重鏈可變區、輕鏈可變區；以及第二條肽鏈，包括TIGIT胞外區和第二Fc區；其中，所述CD16單鏈抗體的C端與所述IL?21分子的N端相連，所述IL?21分子的C端與所述第一Fc區的N端相連，所述TIGIT胞外區的C端與所述Fc區的N端相連。本發明所制備的重組抗體能同時靶向CD16、CD155以及IL?21R，從而介導NK細胞對腫瘤細胞的殺傷，具有較強的腫瘤抑制能力。

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，具體地，涉及重組抗體及其應用，更具體地，涉及重組抗體、核酸分子、表達載體、重組細胞、組合物以及所述重組抗體或抗原結合片段、核酸分子、表達載體、重組細胞或組合物在制備藥物中的用途和試劑盒。

背景技術

癌癥是一種嚴重威脅人民群眾的生命健康的疾病，近年來全球癌癥的發生率、死亡率卻不斷上升。目前已有的癌癥治療手段，包括手術切除、放療、化療、小分子靶向治療、抗體靶向治療、大分子免疫治療等僅能夠在部分癌癥患者中發揮有限的作用，癌癥仍是困擾人類生命健康的難題。

近年來，重組抗體成為了免疫治療中的研究熱點。重組抗體是含有兩種特異性抗原結合位點的人工抗體，能夠在靶細胞(腫瘤細胞)和效應細胞(免疫細胞)之間架起橋梁，產生導向性殺傷腫瘤的效應功能。因此，開發低免疫原性、強親和力的特異性抗體對于治療腫瘤具有重要意義。

發明內容

本申請是基于發明人對以下事實和問題的發現和認識作出的：

腫瘤組織中CD155相對于正常組織的差異化高表達，且CD155結合免疫檢查點受體TIGIT，進而抑制免疫細胞的抗癌功能，CD16抗體單鏈可變片段(ScFv)能夠結合NK細胞，因此，發明人設計了重組抗體CD16×TIGIT，更進一步地，發明人驚喜地發現在所述雙特異性抗體中加入人白細胞介素21(IL-21)后，獲得的重組抗體(CD16×IL-21×TIGITextra)的抗癌能力顯著強于CD16×TIGIT extra雙特異性抗體，并且重組抗體(CD16×IL-21×TIGITextra)誘導產生的炎性細胞因子IL-6顯著低于CD3×TIGIT extra和CD16×TIGITextra雙特異性抗體。

因此，在本發明的第一方面，本發明提出了一種重組抗體。根據本發明的實施例，所述重組抗體為雙鏈抗體，包括：第一條肽鏈，包括CD16單鏈抗體、IL-21分子和第一Fc區，所述CD16單鏈抗體包括重鏈可變區、輕鏈可變區；以及第二條肽鏈，包括TIGIT胞外區和第二Fc區；其中，所述CD16單鏈抗體的C端與所述IL-21分子的N端相連，所述IL-21分子的C端與所述第一Fc區的N端相連，所述TIGIT胞外區的C端與所述Fc區的N端相連。根據本發明實施例的重組抗體可以同時與CD16a、CD155和IL-21R進行結合，有效介導NK細胞對高表達CD155的腫瘤細胞的殺傷作用，且促使免疫細胞產生更少的促炎性細胞因子IL-6，具有較強的腫瘤抑制能力和較高的安全性。

在本發明的第二方面，本發明提出了一種核酸。根據本發明的實施例，所述核酸編碼第一方面所述的重組抗體。根據本發明實施例的核酸可以在一定條件下表達重組抗體，所述重組抗體可以同時與CD16a、CD155和IL-21R進行結合，有效介導NK細胞對高表達CD155的腫瘤細胞的殺傷作用，且促使免疫細胞產生更少的促炎性細胞因子IL-6，具有較強的腫瘤抑制能力和較高的安全性。

在本發明的第三方面，本發明提出了一種表達載體。根據本發明的實施例，攜帶第二方面所述的核酸。所述表達載體可包括可選的控制序列，所述控制序列與所述核酸分子可操作地連接。其中，所述控制序列為可指導所述核酸分子在宿主中表達的一個或多個控制序列。本發明實施例所提出的表達載體可在適合的宿主細胞中高效表達重組抗體，所述重組抗體可以同時與CD16a、CD155和IL-21R進行結合，有效介導NK細胞對高表達CD155的腫瘤細胞的殺傷作用，且促使免疫細胞產生更少的促炎性細胞因子IL-6，具有較強的腫瘤抑制能力和較高的安全性。